Question

15．某工廠為了生產耐高溫植酸酶飼料添加劑，開展了產該酶菌株的篩選、酶的固定化及其特性分析研究，其流程如下．請回答：
土樣中的菌種篩選→菌種鑒定→優良菌株擴大培養→植酸酶提純→植酸酶固定化→植酸酶特性分析
（1）上壤懸液濘先經80℃處理15分鐘，其目的是篩選出耐高溫菌株
（2）在無菌條件下，將經過處理的土壤懸液進行稀釋，然后涂布于含有植酸鈉的固體培養基上．培養后觀察到單菌落，其周圍出現透明水解圈，圈的直徑大小與植酸酶的活性強弱相關．
（3）篩選獲得的菌株經鑒定后，將優良菌株進行液體擴大培養．培養時齋要振蕩，其主要目的是供氧．液體培養基與固體培養基相比不含有的成分是瓊脂．
（4）在合適條件下，將提純的植酸酶與海藻酸鈉混合后，滴加到一定濃度的鈣離子溶液中，使液滴形成凝膠固體小球．該過程是對酶進行B．
A．吸附B．包埋C．裝柱D．洗滌
（5）溫度與植酸酶相對酶活性的關系如圖所示．下列敘述錯誤的是D．
A．測試溫度中，固定化與非固定化植酸酶的最適溫度分別為60℃和45℃
B．測試溫度范圍內，固定化植酸酶的相對酶活性波動低于非固定化植酸酶
C．固定化與非固定化植酸酶相比，相對酶活性在80%以上時的溫度范圍較寬
D．65℃時固定化與非固定化植酸酶的相對酶活性因蛋白質變性而位于最低點．

Answer 1

分析 微生物的篩選與分離需要使用選擇培養基．常用的接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法．固定化酶和固定化細胞的方法主要有包埋法、物理吸附法和化學結合法．影響酶的活性的因素主要有溫度和pH等．

解答 解：（1）土壤懸液首先經80℃處理15分鐘，目的是使大多數的不耐高溫的微生物死亡而篩選出耐高溫菌株．
（2）土壤懸液懸液在無菌條件下進行梯度稀釋，使用稀釋涂布平板法接種涂布于含有植酸鈉的固體培養基上，經培養后可以觀察到單菌落的出現，且出現透明圈，透明圈的直徑大小與植酸酶的活性強弱相關．
（3）振蕩培養的目的是向培養液供氧，同時使微生物與培養液充分接觸，有利于微生物的繁殖與生長．液體培養基與固體培養基的區別是液體培養基不含凝固劑瓊脂．
（4）固定化酶和固定化細胞的方法主要有包埋法、物理吸附法和化學結合法．題干所述方法是將提純的植酸酶與海藻酸鈉混合后，滴加到一定濃度的鈣離子溶液中，使液滴形成凝膠固體小球，該過程屬于包埋法．
故選：B．
（5）A、據圖分析，固定化與非固定化植酸酶的最適溫度分別為60℃和45℃，A正確；
B、圖中，在測試溫度范圍內，固定化植酸酶的相對酶活性波動較小，低于非固定化植酸酶的波動，B正確；
C、據圖分析，固定化與非固定化植酸酶相比，相對酶活性在80%以上時的溫度范圍較寬，C正確；
D、根據題意，植酸酶屬于耐高溫酶，65℃時固定化與非固定化植酸酶的相對酶活性不是因蛋白質變性而位于最低點，D錯誤．
故選：D．
故答案為：
（1）耐高溫菌株
（2）稀釋    單菌落     植酸酶的活性
（3）供氧    瓊脂
（4）B
（5）D

點評 本題主要考查生物技術實踐中的微生物的篩選與分離、培養、觀察和固定化酶等知識，意在強化學生對生物技術實踐中的核心知識的識記、理解與掌握．