Question

5．自1964年印度科學家培養曼陀羅花藥獲得單倍體植株后，花藥離體培養技術發展迅速，據記載，現在已經有
250多種高等植物的花藥培養成功．
（1）組培中，常采用MS固體培養基，主要包括的成分有水、大量元素、微量元素、有機物，還需要添加植物激素．
（2）細胞分裂素和生長素的使用順序和用量會影響到植物細胞的發育方向．如，為了有利于細胞分裂而不分化，兩種激素的使用順序為：先生長素，后細胞分裂素．花粉植株產生的途徑有兩種：一種是花粉脫分化形成愈傷組織，另一種是形成胚狀體．
（3）進行月季花藥離體培養一般選擇在五月初到五月中旬．對于花粉而言，要采用單核期的花粉，為了鑒定該時期的花粉，常采用醋酸洋紅法進行染色鑒定．若是某些植物花粉細胞不易著色，常采用焙花青鉻礬法法染色，能將花粉的細胞核染成藍黑色．
（4）消毒后的花蕾，在無菌條件下除去萼片與花瓣，剝離花藥時，盡量不要損傷花藥，同時要將花絲 徹底去除．

Answer 1

分析 1、組織培養常用的MS培養基含大量元素、微量元素、有機物，有機物包括甘氨酸、維生素B₁、維生素B₆、煙酸、肌醇、蔗糖、瓊脂等，還需要添加植物生長素、細胞分裂素等植物生長調節物質，微生物培養基不含有植物激素．MS培養基含氨基酸，如甘氨酸，含碳源，如蔗糖，含維生素B₁和維生素B₆
2、細胞分裂素和生長素的使用順序不同，培養的結果不同．先使用生長素，再使用細胞分裂素，有利于細胞分裂，但細胞不分化；先使用細胞分裂素，后使用生長素，細胞既分裂又分化；兩者同時使用，細胞分化頻率提高．
2、在植物組織培養時，通過調節生長素和細胞分裂素的比值能影響愈傷組織分化出根或芽．因此從愈傷組織形成完整植株的途徑有兩條，具體通過那一條途徑主要取決于培養基成分中激素的種類及其濃度配比；由花粉離體培養得到的是植株是單倍體植株，這也說明成熟花粉細胞具有全能性．
3、通常選擇植物單核期的花藥培養成功率最高．花藥取樣后通常用醋酸洋紅法染成紅色鏡檢，對不易著色的則用焙花青-鉻礬法對其染色，顏色是藍黑色．

解答 解：（1）組培中，常采用MS固體培養基，主要包括的成分有水、大量元素、微量元素、有機物，還需要添加植物激素．
（2）細胞分裂素和生長素的使用順序不同，培養的結果不同．先使用生長素，再使用細胞分裂素，有利于細胞分裂，但細胞不分化，植物的花粉在適宜的培養基上培養產生花粉植株的兩種途徑：一種是花粉通過胚狀體階段發育為植株，另一種是花粉在誘導培養基上先形成愈傷組織，再將其誘導分化成植株．這兩種途徑之間并沒有絕對的界限，主要取決于培養基中的激素的種類和濃度配比．
（3）選擇月季單核期的花藥培養成功率最高．花藥取樣后通常用醋酸洋紅法染色鏡檢，對不易著色的則用焙花青-鉻礬法對其染色，能將花粉的細胞核染成藍黑色．
（4）消毒后的花蕾，在無菌條件下除去萼片與花瓣，剝離花藥時，盡量不要損傷花藥，同時要將花絲徹底去除．
故答案為：
（1）MS固體    微量元素     
（2）先生長素，后細胞分裂素     胚狀體
（3）單核（單核居中到單核靠邊）   焙花青鉻礬法      藍黑     
（4）花絲

點評 對于月季花藥離體培養技術的掌握是解題的關鍵．