Question

16．利用基因工程技術將魚的抗凍蛋白基因導入番茄，試圖培育出耐寒能力強的番茄．下列相關說法，錯誤的是（　　）

• A． 可用PCR技術或逆轉錄法獲得抗凍蛋白基因
• B． 將抗凍蛋白基因與相應載體連接構建基因表達載體
• C． 利用農桿菌轉化法將基因表達載體導入受體細胞
• D． 檢測到番茄細胞中具有抗凍蛋白基因，培育出的番茄一定具有抗寒能力

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：A、基因工程中獲取目的基因的方法包括PCR技術體外擴增、從基因文庫中獲取或人工合成（如逆轉錄法獲得目的基因），A正確；
B、基因工程的核心步驟是構建基因表達載體，即將目的基因（抗凍蛋白基因）與相應載體連接構建基因表達載體，B正確；
C、將目的基因導入植物細胞常用農桿菌轉化法，C正確；
D、檢測到番茄細胞中具有抗凍蛋白基因，但抗凍蛋白基因不一定能成功表達，因此培育出的番茄不一定具有抗寒能力，D錯誤．
故選：D．

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的概念、原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能結合所學的知識準確判斷各選項．