Question

14．組織型纖溶酶原激活劑（tPA）在人體纖溶和凝血的平衡調節中發揮著關鍵性的作用，如圖是利用奶牛乳汁生產組織型纖溶酶原激活劑（tPA）的圖解，據圖回答下列問題：
（1）過程①在構建的基因表達載體中，應將tPA基因首端與乳腺蛋白基因的啟動子等調控組件結合，③過程常用的方法是顯微注射法．
（2）要獲得單個成纖維細胞，過程②需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理奶牛胎兒皮膚組織塊．在單個組織細胞的培養過程中，為了防止雜菌污染，通常還要在細胞培養液中添加一定量的抗生素．
（3）成功進入成纖維細胞的tPA基因，最終在轉基因牛C中維持穩定和表達的過程稱為轉化，④涉及到的生物技術為細胞核移植技術，得到的轉基因牛C稱之為轉基因克隆動物．
（4）從A到B過程中所用的胚胎工程技術是早期胚胎培養．從個體水平上看，若轉基因牛的乳汁中產生組織型纖溶酶原激活劑，則可確定轉基因牛培育成功．

Answer 1

分析 分析題圖：②是動物細胞培養過程，需要先用胰蛋白酶將細胞分散成單個細胞；①是目的基因（血清白蛋白基因）；③表示采用轉基因技術，將目的基因（血清白蛋白基因）導入受體細胞的過程；④是細胞核移植；⑤為早期胚胎的培養；⑥表示胚胎移植過程．

解答 解：（1）過程①為構建的基因表達載體過程，應將tPA基因首端與乳腺蛋白基因的啟動子等調控組件結合形成重組DNA，③過程為導入受體細胞的過程，常用的方法是顯微注射法．
（2）動物細胞培養時，需要用胰蛋白酶（膠原蛋白酶）處理動物組織，以獲得單個細胞．故要獲得單個成纖維細胞，過程②需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理奶牛胎兒皮膚組織塊．在單個組織細胞的培養過程中，為了防止雜菌污染，通常還要在細胞培養液中添加一定量的抗生素．
（3）成功進入成纖維細胞的tPA基因，最終在轉基因牛C中維持穩定和表達的過程稱為轉化，④為克隆過程，涉及到的生物技術為細胞核移植技術，得到的轉基因牛C稱之為轉基因克隆動物．
（4）從A到B過程中所用的胚胎工程技術是早期胚胎培養．若轉基因牛的乳汁中產生組織型纖溶酶原激活劑，則說明轉基因已經表達，可確定轉基因牛培育成功．
故答案為：
（1）乳腺蛋白    顯微注射法
（2）胰蛋白酶或膠原蛋白酶    抗生素
（3）轉化    細胞核移植技術
（4）早期胚胎培養   轉基因牛的乳汁中產生組織型纖溶酶原激活劑

點評 本題結合乳腺生物反應器的制備過程圖，綜合考查基因工程、動物體細胞核移植、動物細胞培養、胚胎移植、胚胎分割等技術，要求考生識記基因工程的操作步驟及應用，能準確判斷圖中各過程的名稱；識記動物細胞培養的過程；識記胚胎移植的過程．