Question

3．2011年，荷蘭皇家航空公司宣布，從9月份起，啟用以生物柴油（即俗稱的“地溝油”）為燃料的客機執飛阿姆斯特丹至巴黎的航班，以減少碳排放．科學家發現，在微生物M（單細胞）產生的脂肪酶作用下，可以將地溝油提取的植物油與甲醇反應能夠合成生物柴油．

（1）用培養基培養微生物時，培養基中應有碳源、氮源、水  和無機鹽等營養，同時還必須滿足微生物生長對特殊營養物質、pH、氧氣  的要求．在篩選產脂肪酶的微生物M時，應用選擇培養基，可以在培養基中添加植物油作為唯一碳源．
（2）培養基滅菌采用的最適方法是高壓蒸汽滅菌法．
（3）圖示是采用純化微生物M培養的兩種接種方法接種后培養的效果圖，過程一的接種方法是平板劃線法，過程二的接種方法是稀釋涂布平板法，此方法計數的微生物M的數目＜（＞、=、＜）實際活菌數，接種后應注意培皿基要倒置放置．

Answer 1

分析 1、培養基的基本成分：水、無機鹽、碳源、氮源及特殊生長因子；
2、無菌操作，包括滅菌和消毒兩種方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；滅菌的方法有干熱滅菌、灼燒滅菌和高壓蒸汽滅菌；
3、微生物的接種：微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，常用來統計樣品活菌數目的方法是稀釋涂布平板法．

解答 解：（1）微生物的培養基的基本成分包括水、無機鹽、碳源、氮源及特殊生長因子等．同時還必須滿足微生物生長對特殊營養物質、pH、氧氣的要求．已知脂肪酶能夠催化脂肪水解為脂肪酸和甘油，篩選產脂肪酶的微生物時，宜用植物油作為培養基中的唯一碳源，從功能上講，這種培養基屬于選擇培養基．
（2）培養基一般有高壓蒸汽滅菌法滅菌．
（3）接種微生物常用的方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法，獲得圖過程一的接種方法是平板劃線法，過程二的接種方法是稀釋涂布平板法．用稀釋涂布平板法計數比實際值偏小．接種后應注意將培皿基倒置放置．
故答案為：
（1）水、無機鹽、碳源、氮源  特殊營養物質 pH 氧氣 選擇 植物油
（2）高壓蒸汽滅菌
（3）平板劃線法   稀釋涂布平板法＜倒置

點評 本題考查微生物的分離和培養，要求考生識記滅菌技術，掌握實驗室介質微生物常用的方法，能根據圖中信息準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．