Question

2．圖是利用基因工程和植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得新植株的過程，請回答：

（1）農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒分布在細菌細胞的細胞質(zhì)，圖中A表示Ti質(zhì)粒的T-DNA，切割A(yù)需要使用限制酶．
（2）C→D過程需要使用鈣離子處理，使D處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，這種細胞稱為感受態(tài)細胞．
（3）培養(yǎng)E需要添加營養(yǎng)物質(zhì)和植物激素，其目的是誘導(dǎo)細胞通過脫分化和再分化過程發(fā)育為完整植株，培養(yǎng)要求無菌操作的原因是如不進行無菌操作，微生物會在培養(yǎng)基上快速繁殖，與離體培養(yǎng)的植物組織競爭．
（4）植株組織培養(yǎng)過程中，判斷愈傷組織是否產(chǎn)生，依據(jù)是看是否產(chǎn)生了排列疏松而無規(guī)則、高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的細胞．

Answer 1

分析 1、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細胞 ④目的基因的檢測與鑒定．
2、基因工程的工具有：限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和運載體．需要限制酶來切割以獲取目的基因，同時需要相同的限制酶切割運載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過DNA連接酶連接目的基因和運載體．
3、將目的基因?qū)�入原核細胞，常用CaCl₂處理以增加細胞壁的通透性，變成感受態(tài)細胞，能吸收周圍的DNA分子．

解答 解：（1）農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒是擬核外環(huán)狀DNA分子，分布在細菌細胞的細胞質(zhì)，圖中A表示Ti質(zhì)粒的T-DNA，切割A(yù)需要使用限制性內(nèi)切酶切割．
（2）作為受體細胞，常用Ca²⁺處理法，使其成為感受態(tài)細胞，使其處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)．
（3）培養(yǎng)E需要添加營養(yǎng)物質(zhì)和植物激素，其目的是誘導(dǎo)細胞通過脫分化和再分化過程發(fā)育為完整植株，培養(yǎng)要求無菌操作的原因是如不進行無菌操作，微生物會在培養(yǎng)基上快速繁殖，與離體培養(yǎng)的植物組織競爭．
（4）判斷愈傷組織是否產(chǎn)生，依據(jù)是：看是否產(chǎn)生了排列疏松而無規(guī)則、高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的細胞．
故答案為：
（1）細胞質(zhì)  T-DNA  限制酶 
（2）鈣離子  感受態(tài)細胞
（3）脫分化和再分化  如不進行無菌操作，微生物會在培養(yǎng)基上快速繁殖，與離體培養(yǎng)的植物組織競爭 
（4）排列疏松而無規(guī)則、高度液泡化的呈無定形狀態(tài)

點評 本題結(jié)合操作過程示意圖考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的工具及操作步驟，能準確判斷圖中各過程，能結(jié)合所學的知識準確答題．