Question

某目的基因兩側的DNA序列所含的限制性核酸內切酶位點如圖所示，最好應選用下列哪種質粒作為載體（　　）

• A、
• B、
• C、
• D、

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：分析題圖：目的基因左側有限制酶NheⅠ和AluⅠ的識別序列，右側有限制酶NheⅠ和SmaⅠ的識別序列，若僅用限制酶NheⅠ，能獲取目的基因，但可能會導致自身環化或于運載體反向連接；若選用限制酶NheⅠ和AluⅠ，可能獲取的是不含目的基因的DNA片段；因此最后選用限制酶NheⅠ和SmaⅠ來切割．

解答： 解：A、目的基因只有一側含有限制酶NheⅠ的識別序列，用此酶不能獲取目的基因，A錯誤；
B、目的基因兩側含有限制酶AluⅠ的識別序列，但只用此酶切割可能會導致目的基因和質粒反向連接或自身環化，B錯誤；
C、目的基因兩側含有限制酶NheⅠ和AluⅠ的識別序列，但用這兩種酶切割可能會獲得不含目的基因的片段，C錯誤；
D、目的基因兩側含有限制酶NheⅠ和SmaⅠ的識別序列，用這兩種酶切割會獲取目的基因，而且能防止目的基因和質粒的自身環化和反向連接，D正確．
故選：D．

點評：本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、使用工具及操作步驟，能分析目的基因兩側限制酶的分布情況，并能據此選出最合適的運載體，屬于考綱理解層次的考查．