Question

3．牛奶是微生物生長的良好培養基．生鮮牛奶中的微生物情況反映了奶牛的健康狀況，也影響奶制品的運輸和貯藏．牛奶在飲用前都要經過巴氏消毒，以殺死有害微生物．為檢測消毒前后牛奶中細菌含量變化情況，做如圖1所示操作．用無菌吸管從錐形瓶中吸取1mL生牛奶稀釋液至盛有9mL無菌水的試管中，混合均勻，如：此再重復2次．請回答下列有關問題：

（1）巴氏消毒的方法是70-75℃煮30分鐘（80℃煮15分鐘），使用這種方法對生鮮牛奶進行消毒的好處是牛奶的營養成分不被破壞
（2）取最終的牛奶稀釋液0.1mL滴在培養基上進行涂布，應選擇的涂布工具是圖2中的B
（3）圖中所示方法為稀釋培養法，理想情況下，培養一段時間后可在培養基表面形成菌落．若用該方法培養設置了3個培養皿，菌落數分別為35個、33個、34個，則可以推測生牛奶中每毫升含細菌數為3.4×10⁶個．運用這種方法統計的結果往往較實際值偏小（填“偏大”或“偏小”），原因是個別菌落可能是由2個或多個細菌形成．
（4）消毒后的牛奶中絕大部分細菌被殺死，若繼續用該方法檢測消毒后的牛奶中細菌的數量，則在操作步驟上應做什么改動？稀釋次數減少．
（5）從生牛奶取樣培養得到的菌落中，混有各種雜菌，從中檢測出大腸桿菌的方法是在培養基中加人伊紅美藍（金屬光澤的紫），菌落具有黑色特征的可以認定為大腸桿菌．

Answer 1

分析 圖1為稀釋涂布平板法，圖2中A為接種環，B為涂布器，C為滴管，D為接種針．
滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所用的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌，適用對象主要有接種環、接種針、玻璃器皿、培養基等．消毒是指使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內部的部分微生物（不包芽孢和孢子），常用的方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法，適用對象主要有操作空間、某些液體、雙手等．稀釋涂布平板法常用來進行微生物的計數．

解答 解：（1）常用的消毒方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法．巴氏消毒的方法是指70-75℃煮30分鐘或80℃煮15分鐘，使用這種方法對生鮮牛奶進行消毒的好處是牛奶的營養成分不被破壞．
（2）將液體菌種接種在固體培養基上常用的方法主要是稀釋涂布平板法，所用的接種工具是涂布器．即圖2中的B．
（3）由于圖中稀釋了10⁴倍，牛奶中每毫升含細菌數為（35+33+34）÷3÷0.1×10⁴=3.4×10⁶個．由于經此方法接種培養時當兩個或多個菌落重疊在一起時按一個菌落計算，所以運用這種方法統計的結果往往較實際值偏小．
原因是 個別菌落可能是由2個或多個細菌形成．
（4）消毒后的牛奶中絕大部分細菌被殺死，若繼續用該方法檢測消毒后的牛奶中細菌的數量，由于細菌數目減少，故應稀釋次數減少．
（5）檢測大腸桿菌的方法是在培養基中加人伊紅美藍，菌落具有（金屬光澤的紫）黑色特征的可以認定為大腸桿菌．
故答案為：
（1）70-75℃煮30分鐘（80℃煮15分鐘）   牛奶的營養成分不被破壞
（2）B
（3）3.4×10⁶ 偏小    個別菌落可能是由2個或多個細菌形成
（4）稀釋次數減少 
（5）伊紅美藍     （金屬光澤的紫）黑色

點評 本題主要考查微生物的培養的相關知識，關鍵是要求學生弄清滅菌與消毒的概念、方法、適用對象和微生物的接種與計數．