Question

4．如圖為細胞融合的簡略過程，請據圖問答：
（1）植物細胞工程常用的技術手段有植物組織培養、植物體細胞雜交．動物細胞工程的各技術手段中的基礎是動物細胞培養．
（2）若圖中A、B是植物細胞，在細胞融合之前應用纖維素酶、果膠酶處理，除去細胞壁；A、B到細胞C的過程中，常用的化學方法是PEG誘導；融合完成的標志是再生出細胞壁．
（3）與植物細胞相比，動物細胞融合特有的誘導融合的方法是滅活的病毒．
（4）若利用動物細胞融合技術來生產單克隆抗體，應采用經免疫的B細胞和骨髓瘤細胞兩種細胞進行融合，融合后需經多次篩選，以得到能產特異抗體的雜交瘤細胞，第一次篩選一般利用選擇培養基進行，第二次篩選需對細胞進行反復的克隆化培養和抗體陽性檢驗，以篩選出能產特定抗休的雜交瘤細胞．
（5）少量生產單克隆抗體時，可將篩選得到的雜交瘤細胞注入到小鼠腹腔內繁殖，該方法的優點是節約培養基（成本），易于控制培養條件等．

Answer 1

分析 1、植物體細胞雜交和動物細胞融合的比較：

項目	細胞融合原理	細胞融合方法	誘導手段	用途
植物體細胞雜交	細胞膜的流動性，（細胞的全能性）	去除細胞壁后誘導原生質體融合	離心、電刺激、聚乙二醇等試劑誘導	克服遠緣雜交不親和，獲得雜交植株
動物細胞融合	細胞膜的流動性	使細胞分散后，誘導細胞融合	離心、電刺激、聚乙二醇、滅活病毒等試劑誘導	制備單克隆抗體的技術之一

2、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，即用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體．

解答 解：（1）植物細胞工程常用的技術手段有植物組織培養、植物體細胞雜交．動物細胞工程的各技術手段中的基礎是動物細胞培養．
（2）植物體細胞雜交前，先采用酶解法去除細胞壁，即采用纖維素酶、果膠酶處理除去細胞壁；誘導細胞融合常用的化學方法是PEG誘導；原生質體融合完成的標志是再生出細胞壁．
（3）誘導原生質體融合的方法有物理法（離心、振動、電激等）、化學法（聚乙二醇），誘導動物細胞融合的方法有物理法（離心、振動、電激等）、化學法（聚乙二醇）和生物法（滅活的病毒）．因此，與植物細胞相比，動物細胞融合特有的誘導融合的方法是滅活的病毒．
（4）若利用動物細胞融合技術來生產單克隆抗體，應將經免疫的B細胞和骨髓瘤細胞融合，融合后需經多次篩選，以得到能產特異抗體的雜交瘤細胞，第一次篩選一般利用選擇培養基進行，第二次篩選需對細胞進行反復的克隆化培養和抗體陽性檢驗，以篩選出能產特定抗休的雜交瘤細胞．
（5）少量生產單克隆抗體時，可將篩選得到的雜交瘤細胞注入到小鼠腹腔內繁殖，該方法的優點是節約培養基（成本），易于控制培養條件等．
故答案為：
（1）植物組織培養、植物體細胞雜交     動物細胞培養
（2）纖維素酶、果膠酶    細胞壁    PEG誘導    再生出細胞壁
（3）滅活的病毒
（4）經免疫的B細胞    骨髓瘤細胞    選擇培養基    克隆化培養和抗體陽性檢驗
（5）節約培養基（成本），易于控制培養條件等

點評 本題考查植物體細胞雜交和單克隆抗體的制備，要求考生識記植物體細胞雜交的具體過程；識記單克隆抗體的制備過程，能結合所學的知識準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．