Question

4．如圖為轉基因煙草培育過程流程圖，回答問題：
（1）攜帶外源基因的質粒除了含有外源基因外，還包括啟動子、終止子復制原點和標記基因，其中標記基因的作用是鑒別受體細胞中國是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．
（2）圖示過程中，將目的基因導入煙草細胞使用了農桿菌轉化法法，①過程要用鈣離子處理農桿菌，使之轉變為感受態，然后將它們在緩沖液中混合培養以完成轉化過程．
（3）②過程叫做植物組織培養技術，其理論基礎是植物細胞具有全能性．
（4）該轉基因煙草產生的配子中不一定（填“一定”或“不一定”）含有目的基因．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（l）基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等，其中標記基因的作用是鑒別受體細胞中國是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．
（2）由圖可知，將目的基因導入受體細胞的方法是農桿菌轉化法．，①過程要先用 Ca²⁺處理細胞，使其成為感受態細胞，再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態細胞混合，在一定的溫度下促進感受態細胞吸收DNA分子，完成轉化過程．
（3）將轉基因細胞培養成轉基因植株還需采用植物組織培養技術，其理論基礎是植物細胞具有全能性．
（4）由于導入的目的基因是單個的，不是成對的，所以該轉基因煙草產生的配子中不一定含有目的基因．
故答案為：
（1）啟動子 終止子 鑒別受體細胞中國是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來
（2）農桿菌轉化法 鈣離子
（3）植物組織培養 植物細胞具有全能性
（4）不一定

點評 本題結合轉基因煙草的培育過程圖解，考查基因工程和細胞工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟中的相關細節；識記植物組織培養的過程、條件及原理等基礎知識，能結合所學的知識準確答題．