Question

8．請根據所學知識回答以下問題：
（1）有2位同學用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數．在對應稀釋倍數為10⁶的培養基中，得到以下2種統計結果：甲同學在該濃度下涂布了一個平板，統計的菌落數為230；乙同學在該濃度下涂布了3個平板統計的菌落數分別為21、212、256，并且取平均值163作為統計結果；請評價這兩位同學的實驗結果的有效性
①甲同學是否合理：不合理，原因是沒有設置重復組，結果不具有說服力．
②乙同學是否合理：不合理，原因是1個計數結果與另2個相差太遠（或在操作過程中可能出現錯誤，或只簡單地計算了平均值）．
③正確做法是在設計實驗時，一定要涂布至少3個平板作為重復組，才能增強實驗的說服力與準確性．在分析實驗結果時，一定要考慮所設置的重復組的結果是否相當，結果差距太大，意味著操作有誤，需要重新實驗．
④稀釋涂布平板法所用培養基按物理性質劃分屬于固體培養基；
⑤倒平板前保證培養基無雜菌的常用方法是用高壓蒸汽滅菌．
（2）生物工程常需分離酵母菌和Taq耐熱菌，分離方法常用選擇培養基．例如用加高濃度食鹽的適宜培養基，分離金黃色葡萄球菌．請提出從含細菌、酵母菌和Taq耐熱菌的培養液中分離酵母菌和Taq耐熱菌的方案．
⑥分離酵母菌用加青霉素的選擇培養基分離酵母菌．
⑦分離Taq耐熱菌用高溫培養條件分離Taq耐熱菌．

Answer 1

分析 1、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落．
注：這兩種方法中，稀釋涂布平板法可用于微生物的計數．
2、消毒和滅菌

	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強烈的理化因素殺死物體內外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環、接種針、玻璃器皿、培養基等

解答 解：（1）①甲同學實驗操作不合理，原因是只涂布了一個平板，未設置對照組．
②乙同學結果也不合理，因1個計數結果與另2個相差太遠，不能簡單的用其平均數．
③在設計實驗時，一定要涂布至少3個平板作為重復組，才能增強實驗的說服力與準確性．在分析實驗結果時，一定要考慮所設置的重復組的結果是否相當，結果差距太大，意味著操作有誤，需要重新實驗．
④因培養基中加了凝固劑瓊脂，故按物理性質劃分屬于固體培養基．
⑤培養基滅菌的方法常用高溫蒸汽滅菌法．
（2）⑥由于酵母菌為真菌，故可用加抗生素的選擇培養基分離酵母菌．
⑦分離Taq耐熱菌可根據該菌的特點用高溫條件進行選擇培養．
故答案為：
（1）①不合理       沒有設置重復組，結果不具有說服力
②不合理       1個計數結果與另2個相差太遠（或在操作過程中可能出現錯誤，或只簡單地計算了平均值）
③在設計實驗時，一定要涂布至少3個平板作為重復組，才能增強實驗的說服力與準確性．在分析實驗結果時，一定要考慮所設置的重復組的結果是否相當，結果差距太大，意味著操作有誤，需要重新實驗
④固體  
⑤用高壓蒸汽滅菌
（2）⑥用加青霉素的選擇培養基分離酵母菌
⑦用高溫培養條件分離Taq耐熱菌

點評 本題的知識點是微生物培養過程中的無菌技術，分離微生物的方法，主要考查學生設計和完善實驗步驟，分析實驗結果獲取結論的能力和提出問題進行進一步探究的能力，利用所學的微生物知識解決生活問題的能力．