Question

7．隨著現(xiàn)代生物科學技術的發(fā)展，轉基因生物越來越多．下面是轉基因獼猴的培育過程．請據圖回答有關的問題．

（1）基因表達載體導入成纖維細胞的常用方法是顯微注射法．在基因表達載體中，綠色熒光蛋白基因前端必須有啟動子．
（2）檢測綠色熒光蛋白基因是否整合到獼猴的成纖維細胞DNA分子上的方法是DNA分子雜交，從分子水平檢測綠色熒光蛋白基因是否在受體細胞成功翻譯的技術是抗原-抗體雜交．
（3）在③過程培養(yǎng)重組細胞時，培養(yǎng)液中通常加入抗生素的目的是防止培養(yǎng)液被污染，培養(yǎng)液含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生索和動物血清等．
（4）質粒上標記基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因．
（5）圖中的過程④稱為胚胎移植，為使代孕獼猴與供體雌獼猴生殖器官的生理變化相同，此前需對代孕雌猴作同期發(fā)情處理．
（6）在轉基因獼猴的培育過程中及的動物細胞工程技術有動物細胞培養(yǎng)、體細胞核移植技術．

Answer 1

分析 1、分析題圖：圖示為轉基因獼猴的培育過程示意圖，其中①表示基因表達載體的構建過程；②表示轉基因動物細胞培養(yǎng)和選擇的過程；③表示表示早期胚胎培養(yǎng)；④表示胚胎移植．
2、標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．單克隆抗體制備的兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）②篩選出能夠產生特異性抗體的細胞群．
3、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）將重組質粒導入動物細胞時，一般采用顯微注射技術；基因表達載體中應含有綠色熒光蛋白基因（目的基因），啟動子、終止子和標記基因，故綠色熒光蛋白基因前端必須有啟動子．
（2）檢測綠色熒光蛋白基因是否整合到獼猴的成纖維細胞DNA分子上的方法可用DNA分子雜交，從分子水平檢測綠色熒光蛋白基因是否在受體細胞成功翻譯的技術是抗原-抗體雜交，檢測是否產生了熒光蛋白．
（3）細胞培養(yǎng)時，培養(yǎng)液中通常加入抗生素的目的是防止培養(yǎng)液被污染，培養(yǎng)液含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生索和動物血清等．
（4）標記基因的作用是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．
（5）圖中的過程④稱為胚胎移植，為使代孕獼猴與供體雌獼猴生殖器官的生理變化相同，此前需對代孕雌猴作同期發(fā)情處理．
（6）在轉基因獼猴的培育過程中及的動物細胞工程技術有動物細胞培養(yǎng)、體細胞核移植技術．
故答案為：
（1）顯微注射法  啟動子
（2）DNA分子雜交  抗原-抗體雜交 
（3）防止培養(yǎng)液被污染  動物血清 
（4）鑒別受體細胞中是否含有目的基因 
（5）胚胎移植  同期發(fā)情 
（6）動物細胞培養(yǎng)、體細胞核移植技術

點評 本題考查基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關知識，要求考生識記核移植的具體過程；胚胎移植的基本程序；識記基因工程的具體操作步驟，掌握各步驟中的細節(jié)，能結合所學的知識準確答題．