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13.白花蛇舌草是我國民間常用的中草藥,科學工作者用RPMI-1640培養基配制出不同濃度的白花蛇舌草提取物(HDE)工作液,分別處理人白血病細胞株(K562),測得線粒體內膜跨膜電位的變化如圖1,測得凋亡抑制基因Survivin和原癌基因Bcl-2表達的變化情況如圖2.

(1)K562細胞是由于原癌基因發生突變,導致正常細胞的生長和分裂失控而變成癌細胞.
(2)圖1中HDE處理48h后K562細胞內線粒體內膜跨膜電位下降最顯著.跨膜電位下降影響線粒體的功能,導致ATP合成停止,并釋放調亡誘導因子,最終引起細胞的凋亡或死亡.
(3)收集用HDE處理的K562細胞中Survivin和Bcl-2的mRNA,在逆轉錄酶的作用下合成cDNA,再通過PCR技術擴增cDNA,然后測定其含量,結果如圖2所示.其中對照組的處理是使用等量不含HDE的RPMI-1640培養基.β-Actin基因在各組織和細胞中的表達相對恒定,在PCR中的作用是對照.從圖2數據可知,用HDE處理2周的K562細胞中Survivin和Bcl-2的表達明顯低于未經處理的細胞.
(4)綜上所述,HDE可能通過降低線粒體內膜跨膜電位,抑制抗凋亡基因的表達,從而抑制K562白血病細胞增殖.
(5)如果白花蛇舌草沒有明顯的毒副作用,依據本實驗的結果,用它制藥的最佳用量是使人體的血藥濃度達到12.8mL/L.

分析 分析圖1:圖中在每個時間內隨著白花蛇舌草提取物濃度的增加,電位變化逐漸增加,同一白花蛇舌草提取物度下隨著時間的推移,電位變化先增加后減少,據此答題.

解答 解:(1)K562細胞是一種癌細胞,具有無限增值的特點,是細胞內原癌基因發生突變,導致正常細胞的生長和分裂失控而變成癌細胞.
(2)圖1中白花蛇舌草提取物HDE處理大約48 h后,K562細胞內線粒體內膜跨膜電位下降明顯.從而影響線粒體的功能,導致細胞內ATP 合成停止,并釋放調亡誘導因子,最終引起細胞的凋亡或死亡.
(3)實驗組中獲得的mRNA在逆轉錄 酶的作用下,通過逆轉錄過程可用合成cDNA,然后通過PCR 技術擴增cDNA,獲得大量的cDNA.其對照組使用的是等量不含HDE的RPMI-1640培養基.根據題意分析β-Actin基因在PCR中起對照作用.從圖2數據可知,用HDE處理2周的K562細胞中Survivin和Bcl-2的表達明顯低于未經處理的細胞.
(4)根據以上分析控制HDE可能通過降低線粒體內膜跨膜電位,抑制抗凋亡基因的表達,從而抑制K562白血病細胞增殖.
(5)圖中12.8效果最明顯,即用它制藥的最佳用量是使人體的血藥濃度達到12.8mL/L.
故答案為:
(1)原癌
(2)48      ATP
(3)逆轉錄    PCR   不含HDE的RPMI-1640培養基對照明顯低于
(4)降低線粒體內膜跨膜電位  抑制
(5)12.8

點評 本題的知識點是探究癌細胞防治的機理,主要考查學生的識圖能力,評價并完善實驗步驟,分析實驗結果獲取結論的能力和根據提供信息 進行推理的能力.

練習冊系列答案
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抗菌肽濃度(ug/ul)0110-110-210-310-410-5
實驗組別及研究內容
3H-TdR攝取量4000110011802400412043104220
活細胞總數100140-153180-200212-240148-16080-9220-40
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①這種現象體現了膜具有一定流動性特點,當抗菌肽的濃度超過10-2(ug/ul)后,癌細胞增殖數目小于 凋亡數目.
②細胞凋亡的本質是凋亡基因的表達.
(3)圖乙中甲醇誘導表達體現了表現型與性狀的關系是表型是基因型和環境共同作用的結果.分離與純化抗菌肽常使用的方法有電泳或凝膠色譜法.

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