Question

1．為了調查某河流的水質狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌的分離等工作．回答下列問題：
（1）該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量．在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空平板先行培養了一段時間，這樣做的目的是檢測培養基平板滅菌是否合格；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經適當培養后，3個平板上的菌落數分別為39、38和37．據此可得出每升水樣中的活菌數為3.8xl0⁷個/L．
（2）該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌．操作時，接種環通過灼燒滅菌，在第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線．這樣做的目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落．
（3）圖1和圖2是培養某細菌的結果圖，其對應的接種方法分別：稀釋涂布平板法和平板劃線法，這兩種方法接種后培養基上都可以得到由單個細菌繁殖所形成的．圖1所用的接種方法可用來對活菌進行計數．此外，測定微生物數目的另一種方法是顯微鏡直接計數法（或“血球計數板計數法”）．
（4）該小組將得到的菌株接種到液體培養基中并混勻，一部分進行靜置培養，另一部分進行振蕩培養．結果發現：振蕩培養的細菌比靜置培養的細菌生長速度快．分析其原因是：振蕩培養能提高培養液的溶解氧含量，同時可以使菌體與培養液充分接觸，提高營養物質的利用率．

Answer 1

分析 分析圖解：圖中細菌的分離的方法為①表示稀釋涂布平板法，②表示平板劃線法．
①稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落．
②平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落．

解答 解：（1）微生物培養過程應該進行無菌操作，配制的培養基要進行高壓蒸汽滅菌，可以將滅菌后的空白平板進行培養以檢測培養基滅菌是否徹底；由題意知1ml水樣中的菌落數是（39+38+37）÷3÷0.1×100=3.8×10⁴個，每升水樣中的活菌數為3.8×10⁴×10³=3.8xl0⁷個/L．
（2）對接種環常用的滅菌方法是灼燒滅菌；在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線的目的是：將聚集的菌體逐漸稀釋分散以便獲得由單個細胞繁殖而來的菌落．
（3）據圖分析，圖1菌落均勻是稀釋涂布平板法接種，圖2是平板劃線法接種．兩種接種方法都可以達到單菌落．圖1所用的接種方法可用來對活菌進行計數．圖1稀釋涂布平板法可用來對活菌進行計數．此外，測定微生物數目的另一種方法是 顯微鏡直接計數法（或“血球計數板計數法”）．
（4）由題意可知，振蕩培養比靜置培養的細菌生長速度快，由此可以說明該細菌是需氧菌，由于振蕩培養提高了培養液中溶解氧的含量，同時可使菌體與培養液充分接觸，提高營養物質的利用率，細菌生長速度加快．
故答案為：
（1）檢測培養基平板滅菌是否合格       3.8xl0⁷個/L
（2）灼燒   將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落
（3）稀釋涂布平板法   平板劃線法（順序顛倒不給分） 菌落     顯微鏡直接計數法（或“血球計數板計數法”）
（4）溶解氧     營養物質

點評 本題主要考查培養基的制作和微生物的接種方法，意在強化學生對實驗室的微生物的培養的相關知識的理解與掌握．