Question

17．下列對基因工程的四大操作步驟的理解有錯誤的一項是（　　）

• A． 限制性核酸內切酶主要存在于微生物體內，識別序列具有特異性
• B． DNA連接酶是作用于斷裂開的兩個脫氧核苷酸之間的化學鍵
• C． 運載體和目的基因之間的連接必須要暴露出相同的黏性末端
• D． 在目的基因的檢測與表達過程只能使用含青霉素的選擇培養基

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：A、限制性核酸內切酶主要存在于微生物體內，識別序列具有特異性，A正確；
B、DNA連接酶是作用于斷裂開的兩個脫氧核苷酸之間的化學鍵，即磷酸二酯鍵，B正確；
C、運載體和目的基因之間的連接必須要暴露出相同的黏性末端，這樣DNA連接酶才能將兩者連接起來，C正確；
D、標記基因不一定是青霉素抗性基因，因此在目的基因的檢測與表達過程不一定要使用含青霉素的選擇培養基，D錯誤．
故選：D．

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能結合所學的知識準確判斷各選項．