Question

15．克隆豬成功率較低，與早期胚胎細胞的異常凋亡有關．Bcl-2 基因是細胞凋亡抑制基因，用PCR 技術可以檢測該基因轉錄水平．克隆豬的培育及該基因轉錄水平檢測流程如圖．

請回答：
（1）將良種豬的組織塊分散成單個細胞的過程中，一般先剪碎，然后用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理．
（2）用促性腺激素處理以獲取更多的卵母細胞，成熟的卵母細胞在核移植前需要通過顯微操作進行去核處理．
（3）在培育克隆豬的過程中，由囊胚的內細胞團細胞分離獲得的胚胎干細胞（ES），在形態上具有體積小、細胞核大，核仁明顯等特點，要維持它們的增殖而不分化的狀態，通常在飼養層細胞上培養．
（4）通過體外受精、早期胚胎培養、胚胎移植等技術可以得到“試管豬”，也可以得到“試管嬰兒”．“設計試管嬰兒”技術與“試管嬰兒”技術的區別是胚胎移植之前進行遺傳學診斷
（5）在PCR 過程中可檢測出cDNA 中Bcl-2cDNA 的分子數，進而計算總mRNA 中Bcl-2mRNA 的分子數，從而反映出Bcl-2 基因的轉錄水平．
①圖中X 表示反轉錄過程．
②從基因組數據庫中查詢Bcl-2mRNA 的核苷酸序列，以便根據這一序列設計合成引物，用于PCR 擴增．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為克隆豬的培育及該基因轉錄水平檢測流程圖，圖中采用動物體細胞核移植技術，即將良種豬體細胞核移植到去核卵細胞中形成重組細胞；早期胚胎培養技術；胚胎移植技術．圖中X表示以mRNA為模板逆轉錄形成cDNA的過程．

解答 解：（1）動物細胞培養過程中，首先要有胰蛋白酶或膠原蛋白酶處于動物組織以獲得單個細胞．
（2）給良種母畜注射促性腺激素可促使其超數排卵；核移植是指將體細胞的細胞核移植到去核卵母細胞中，因此成熟的卵母細胞在核移植前需要通過顯微操作進行去核處理．
（3）胚胎干細胞可來自囊胚的內細胞團，其形態上的特點是體積小、細胞核大，核仁明顯；要維持它們的增殖而不分化的狀態，通常在飼養層細胞上培養．
（4）“試管動物”的培育需要采用體外受精、早期胚胎培養和胚胎移植技術．試管嬰兒技術是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養發育為早期胚胎后，再經移植后產生后代的技術．設計試管嬰兒技術是通過體外受精獲得許多胚胎，然后從中選擇符合要求的胚胎，再經移植后產生后代的技術．可見，“設計試管嬰兒”技術與“試管嬰兒”技術的區別是胚胎移植之前進行遺傳學診斷．
（5）①由以上分析可知X表示逆轉錄過程．
②從基因組數據庫中查詢Bcl-2mRNA 的核苷酸序列，以便根據這一序列設計合成引物，用于PCR擴增．
故答案為：
（1）胰蛋白酶或膠原蛋白酶
（2）促性腺激素    去核
（3）內細胞團         體積小、細胞核大，核仁明顯      飼養層
（4）體外受精、早期胚胎培養、胚胎移植         胚胎移植之前進行遺傳學診斷
（5）①反轉錄    ②引物

點評 本題結合克隆豬的培育過程圖，考查動物體細胞核移植、動物細胞培養、PCR擴增技術的應用，要求考生識記動物體細胞核移植的概念、原理及過程，能準確判斷圖中各過程的名稱；識記PCR技術的條件，能結合題干信息答題．