Question

P53基因是正常細胞內重要的抑癌基因，研究表明P53基因突變可導致肝臟細胞癌變．科學家研究發現P53基因對體外培養的肝癌細胞生長有抑制作用，請回答下列問題：
（1）切下新鮮的肝癌組織，在37℃下用

 

消化30-40分鐘，在5%

 

培養箱中培養，培養基是模擬了人體

 

的成分配制的，在培養基中加入一定量的抗生素，其目的是

 

．
（2）獲取P53基因的方法通常包括

 

和

 

．
（3）將P53基因經過一系列的處理并與脂質體混合，將混合物滴加至肝癌細胞上，輕輕混勻．最后篩選出含有P53基因的肝癌細胞．脂質體在這個操作中的作用是

 

．
（4）為證明P53基因有抑癌作用，需將兩種細胞接入多孔板中，并從次日開始檢測每孔的細胞總數，繪制成如圖所示的生長曲線．請分析兩條曲線分別是哪種細胞，曲線1是

 

細胞，曲線2是

 

細胞．

Answer 1

考點：動物細胞與組織培養過程,基因工程的原理及技術

專題：

分析：分析曲線圖：P53基因是正常細胞內重要的抑癌基因，所以導入P53基因的肝癌細胞數目會下降，即曲線2，而普通肝癌細胞能無限增殖，其數目不斷上升，即曲線1．

解答： 解：（1）動物細胞培養前需要用胰蛋白酶處理組織，使細胞分散成單個細胞．動物細胞培養的條件：①無菌、無毒的環境：消毒、滅菌；添加一定量的抗生素；定期更換培養液，以清除代謝廢物．②營養物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質．③溫度和PH．④一定的氣體環境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養液的PH）．
（2）獲取目的基因（P53基因）的方法通常包括化學方法合成和從基因文庫中獲取．
（3）脂質體在這個操作中的作用是將P53（目的）基因導入肝癌細胞．
（4）P53基因是正常細胞內重要的抑癌基因，所導入P53基因的肝癌細胞數目下降，而普通肝癌細胞能無限增殖，其數目不斷上升，即曲線1是肝癌細胞，曲線2是轉入P53基因的肝癌細胞．
故答案為：
（1）胰蛋白酶    CO₂    內環境    防止雜菌污染    
（2）化學方法合成    從基因文庫中獲取    
（3）將P53（目的）基因導入肝癌細胞    
（4）肝癌細胞    轉入P53基因的肝癌細胞

點評：本題考查動物細胞培養和應用、探究實驗，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內在聯系的能力；能運用所學知識，解決問題的能力；具有對一些生物學問題進行初步探究的能力，并能對實驗現象和結果進行解釋、分析和處理．