Question

6．牛奶是微生物生長的良好培養基，未經消毒處理的牛奶中往往存在多種細菌，有些細菌可引起相關疾病，如具有高度耐鹽性的金黃色葡萄球菌引起人類肺炎、腸炎等疾病．因此，牛奶在飲用前需對其進行消毒，并對消毒后的牛奶中的細菌進行檢測，圖為定性檢測鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程．請回答下列問題：

（1）對于生鮮牛奶可用巴氏消毒法進行消毒，使用這種方法的好處是牛奶的營養成分不被破壞．圖中7.5% NaCl肉湯培養基可為微生物提供的營養成分包括碳源、氮源、水和無機鹽．
（2）為檢測消毒前后牛奶中細菌含量的變化情況，用無菌吸管從盛牛奶的錐形瓶中吸取1mL生鮮牛奶至盛有9mL無菌水的試管中，混合均勻，如此再重復3次．取最終的牛奶稀釋液0.1mL滴在培養基上進行涂布，培養一段時間后可在培養基表面形成菌落．若用該方法培養設置了3個培養皿，菌落數分別為35、33、34，則上述稀釋倍數合適 （填“合適”或“不合適”），運用這種方法統計的結果往往較實際值偏小（填“偏大”或“偏小”）．消毒后的牛奶中絕大部分細菌被殺死，若繼續用該方法檢測消毒后的牛奶中細菌的數量，則在操作步驟上應做什么改動？稀釋次數減少．
（3）金黃色葡萄球菌在血平板（培養基中添加適量血液）土生長時，可破壞菌落周圍的紅細胞，使其褪色．圖示操作中在血平板上的接種方法是平板劃線法．經多次規范操作、重復實驗，血平板上菌落周圍均出現，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，但鮮牛奶供應商仍認為此菌并非鮮牛奶所攜帶，因此，要對本操作進行完善．完善的具體方案是設罝不加鮮牛奶（接種無菌水），其他換作均相同的對照組．

Answer 1

分析 滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所用的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌，適用對象主要有接種環、接種針、玻璃器皿、培養基等．消毒是指使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內部的部分微生物（不包芽孢和孢子），常用的方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法，適用對象主要有操作空間、某些液體、雙手等．稀釋涂布平板法常用來進行微生物的計數．

解答 解：（1）常用的消毒方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法．巴氏消毒的方法是指70-75℃煮30分鐘或80℃煮15分鐘，使用這種方法對生鮮牛奶進行消毒的好處是牛奶的營養成分不被破壞．培養基的基本成分包括碳源、氮源、水和無機鹽．
（2）為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數，因此上述稀釋倍數合適，由于經此方法接種培養時當兩個或多個菌落重疊在一起時按一個菌落計算，所以運用這種方法統計的結果往往較實際值偏小．消毒后的牛奶中絕大部分細菌被殺死，若繼續用該方法檢測消毒后的牛奶中細菌的數量，則在操作步驟上應稀釋次數減少．
（3）分析圖解可知，圖示操作中在血平板上用接種環接種方法為平板劃線法．經多次規范操作、重復實驗，血平板上菌落周圍均出現透明圈，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，但鮮牛奶供應商仍認為此菌并非鮮牛奶所攜帶，因此，要對本操作進行完善．完善的具體方案是設罝不加鮮牛奶（接種無菌水），其他換作均相同的對照組．
故答案為：
（1）牛奶的營養成分不被破壞    碳源、氮源、水和無機鹽
（2）合適      偏小   稀釋次數減少
（3）平板劃線法   透明圈   設罝不加鮮牛奶（接種無菌水），其他換作均相同的對照組

點評 本題主要考查微生物的培養的相關知識，關鍵是要求學生弄清滅菌與消毒的概念、方法、適用對象和微生物的接種與計數．