Question

10．癌胚抗原（CEA）是一種位于腫痛細胞膜表面的蛋白，白細胞介素（IL-2）是一種淋巴因子．研究人員利用質粒plRES、CEA基因、IL-2基因，分別構建了重組質粒plRES-CEA、plRES-IL-2和plRES-CEA-IL-2．將實驗小鼠分成6組，每隔5天進行一次肌肉注射，共3次．最后一次注射完成7天后，檢測小鼠體內CEA含量、NK細胞活性等指標，結果如下表．

	第1組	第2組	第3組	第4組	第5組	第6組
注射物	plRES-CEA-IL-2	plRES-CEA	plRES-IL-2	plRES-IL-2與plRES-CEA混合	空載體plRES	空白
CEA含量	0.889	0.689	0.455	0.863	0.413	0.088
NK細 胞活性	0.395	0.389	0.397	0.397	0.387	0.091
淋巴細 脃數量	3.04	1.77	1.15	2.18	1.07	0.97

請回答問題：
（1）構建重組質粒需要用到的工具酶有限制（性核酸內切）酶、DNA連接酶．要保證重組質粒能夠在細菌中大量擴增，重組質粒必須具有復制原點．
（2）注射plRES-CEA-IL-2后，小鼠體內產生的大量CEA是重組質粒中的目的基因經過轉錄和
翻譯形成的．
（3）NK細胞的活性不依賴于抗原刺激，能自發地溶解多種腫痛細胞和被病毒感染細胞，屬于人體免疫的第二道防線．
（4）從實驗結果看，第1組具有最好的特異性免疫效果．對比第3組和第5組結果可以說明
IL-2有促進淋巴細胞增殖的作用．
（5）第1，2，4組小鼠均可產生CEA抗體，各組之間無顯著性差異，但與第3組、空載體及空白對照組相比有顯著性差異，說明CEA抗體的產生與導入外源CEA基因，使CEA含量增加有關．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）構建重組質粒需要用到的工具酶有限制酶、DNA連接酶．基因表達載體由目的基因、啟動子、終止子、標記基因和復制原點等組件組成，要保證重組質粒能夠在細菌中大量擴增，重組質粒必須具有復制原點．
（2）據題干可知，CEA是一種位于腫痛細胞膜表面的蛋白，故注射plRES-CEA-IL-2后，小鼠體內產生的大量CEA是重組質粒中的目的基因經過轉錄和翻譯形成的．
（3）NK細胞的活性不依賴于抗原刺激，能自發地溶解多種腫痛細胞和被病毒感染細胞，說明為非特異性免疫，屬于人體免疫的第二道防線．
（4）從實驗結果看，第1組淋巴細胞數量最多，故具有最好的特異性免疫效果．第3組和第5組的區別在于第三組具有IL-2，對比兩者結果可以說明IL-2有促進淋巴細胞增殖的作用．
（5）第1，2，4組小鼠均可產生CEA抗體，各組之間無顯著性差異，但與第3組、空載體及空白對照組相比有顯著性差異，說明CEA抗體的產生與導入外源CEA基因，使CEA含量增加有關．
故答案為：
（1）限制（性核酸內切）酶、DNA連接酶     細菌    復制原點
（2）轉錄    翻譯
（3）二
（4）1   5   淋巴細胞增殖
（5）CEA抗體的產生與導入外源CEA基因，使CEA含量增加有關

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節問題，能結合所學的知識準確解答項．