Question

10．凝乳酶是奶酪生產中的關鍵性酶．目前，利用微生物生產高活力的凝乳酶是主要發展方向．如圖1，用紫外線照射芽孢桿菌，分離、培養，再檢測各菌株所產生的凝乳酶活力．請回答下列問題：

（1）為達到分離的目的，需要配制培養基，主要步驟是計算→稱量→溶化→調pH→分裝→倒平板．在接種前，隨機取若干滅菌后的空平板先行培養了一段時間，這樣做的目的是檢測培養基平板滅菌是否合格．
（2）圖中過程b的目的是通過平板劃線法獲得單個菌落；通常使用的劃線工具是接種環．
（3）上述平板培養基中應含有碳源、氮源（缺一不可）、水和無機鹽等營養成分．固體培養基中常用瓊脂作凝固劑，理想的凝固劑應具有的特點是B、D、E（多選）．
A．含有某些特殊的營養物質    B．消毒滅菌不會改變其特性
C．能被微生物分解和利用      D．微生物生長溫度范圍內保持固體狀態
E．配制方便且有良好的透明性
（4）在一定溫度下（35℃），一定時間內（通常為40分鐘），凝固1mL10%脫脂奶粉的酶量為一個酶活力單位（U）凝乳酶活力檢測結果如圖2所示，圖示說明基因突變是不定向的．
（5）同樣是桿菌，但作用大相徑庭．綠膿桿菌常引發燒傷病人化膿性感染，臨床上常用阿洛西林、比阿培南、美羅培南、頭孢菌素等抗生素進行治療．為確定患者體內的綠膿桿菌對上述不同抗生素的敏感性，做了相關的實驗．將含等劑量的阿洛西林、比阿培南、美羅培南、頭孢菌素的相同大小的濾紙片分別均勻置于平板培養基上的不同位置，適宜條件下培養一段時間，觀察結果如圖3．根據結果判斷，患者最適宜選用的抗生素是美羅培南．

Answer 1

分析 微生物的培養基的營養成分主要有碳源、氮源、水和無機鹽等．微生物培養基的制作過程為計算→稱量→溶化→調節pH→分裝→倒平板．微生物培養的關鍵是無菌操作．基因突變是不定向的．

解答 解：（1）配制培養基，主要步驟是計算→稱量→溶化→調節pH→分裝→倒平板．在接種前，需要檢測培養基平板滅菌是否合格，可以隨機取若干滅菌后的空平板先行培養了一段時間．
（2）平板劃線法是純化微生物的常用方法，可以獲得單個菌落；通常使用的劃線工具是接種環．
（3）平板培養基中應含有碳源、氮源、水和無機鹽等營養成分．固體培養基中理想的凝固劑應具有的特點有：消毒滅菌不會改變其特性、微生物生長溫度范圍內保持固體狀、配制方便且有良好的透明性等，而凝固劑本身不能含有營養物質且不能被微生物分解和利用．
（4）芽孢桿菌經紫外線照射后，凝乳酶活力發生了多種方向的變化，說明基因突變是不定向的．
（5）臨床上常用抗生素進行治療細菌感染．根據培養結果判斷，美羅培南周圍空白區域（沒有菌落）最大，說明美羅培南殺滅綠膿桿菌的效果最好．
故答案為：
（1）調pH   檢測培養基平板滅菌是否合格  
（2）單個菌落     接種環 
（3）碳源、氮源（缺一不可）        B、D、E  
（4）不定向的    
（5）美羅培南

點評 本題主要考查微生物的培養基酶活力的測定，意在強化學生對相關實驗的操作機無菌技術的理解與掌握．