Question

15．家蠶細胞具有高效表達目的基因的能力，科研人員將人的干擾素基因導入家蠶細胞并進行大規模培養可以提取干擾素用于自制藥．
（1）在人的DNA分子上獲取干擾素基因時，要用到限制酶．假設該限制酶能專一性的識別DNA上GAATTC序列，并在某些位點切割某化學鍵，該化學鍵的名稱是磷酸二酯鍵．
（2）人的干擾素基因一般來自cDNA文庫，其屬于部分基因（填“基因組”或“部分基因”）文庫．
（3）在此基因工程操作過程中的核心步驟是構建基因表達載體．啟動子位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結合的部位．
（4）將目的基因導入家蠶細胞的常用方法是顯微注射法．
（5）通過PCR技術可大量獲取目的基因，PCR技術的原理是DNA復制．

Answer 1

分析 1、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與表達．從分子水平上檢測目的基因的方法：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．
2、PCR技術的條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩定DNA聚合酶（Taq酶）等．

解答 解：（1）限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（2）人的干擾素基因一般來自cDNA文庫，其屬于部分基因文庫．
（3）基因工程操作過程中的核心步驟是構建基因表達載體．啟動子位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結合的部位．
（4）將目的基因導入動物細胞的常用方法是顯微注射法．
（5）通過PCR技術可大量獲取目的基因，PCR技術的原理是DNA復制．
故答案為：
（1）磷酸二酯鍵
（2）部分基因
（3）構建基因表達載體     首端     RNA聚合酶
（4）顯微注射法
（5）DNA復制

點評 本題綜合考查基因工程的有關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，識記PCR技術的原理、方法以及條件等，能結合所學的知識準確答題．