Question

14．有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同學欲從受原油污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株．回答問題：
（1）在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以原油為唯一碳源的固體培養基上，從功能上講，該培養基屬于選擇培養基．
（2）為篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力強．
（3）純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即平板劃線法和稀釋涂布平板法．
（4）為避免培養液中菌體濃度過高，需將培養液進行梯度稀釋處理．為了排除實驗組中非測試因素對實驗結果的影響（培養基被污染），需設置接種等量無菌水的培養基作為空白對照．
（5）通常情況下，在微生物培養過程中實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌．無菌技術要求實驗操作應在酒精燈火焰附近進行，以避免周圍環境中微生物的污染．

Answer 1

分析 1、培養基的營養構成：各種培養基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽．培養基的分類：①按物理性質分，分為液體培養基和固體培養基，固體培養基中含有凝固劑，一般是瓊脂．②按化學成分分，分為天然培養基和合成培養．兩者的區別是天然培養基成分不確定，合成培養基成分的含量是確定的．③按用途分，分為選擇培養基和鑒別培養基．選擇培養基主要是培養、分離特定的微生物，培養酵母菌可在培養基中加入青霉素；鑒別培養基可以鑒定不同的微生物，比如鑒別飲用水中是否含有大腸桿菌，可以用伊紅-美藍培養基，如果菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤，說明有大腸桿菌．
2、常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法．
培養基、培養皿、接種環、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法．
3、接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體--菌落．

解答 解：（1）欲篩選出能降解原油的菌株，培養基中應只含有原油而無其它碳源，不能降解原油的細菌在此培養基上不能生存，這類培養基屬于選擇培養基．
（2）降解原油能力越強的菌株，在菌落周圍形成的分解圈越大．
（3）分離純化菌種時，需采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，使聚集在一起的細菌細胞分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個的菌落，以便純化菌種．
（4）為避免培養液中菌體濃度過高，需將培養液進行梯度稀釋處理．為了排除實驗組中非測試因素對實驗結果的影響（培養基被污染），需設置接種等量無菌水的培養基作為空白對照．
（5）實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌（如接種環）、干熱滅菌（如培養皿）、高壓蒸汽滅菌（如培養基）等．無菌操作要求在整個實驗過程中操作都在酒精燈火焰附近進行，以避免周圍微生物的污染．
故答案為：
（1）原油       選擇
（2）強
（3）平板劃線法          稀釋涂布平板法
（4）梯度稀釋         實驗組中非測試因素對實驗結果的影響（培養基被污染）
（5）高壓蒸汽滅菌         火焰

點評 本題的知識點是微生物培養過程中的無菌技術，分離微生物的常用的接種方法和接種工具，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內在聯系，形成知識網絡結構的能力；能運用所學知識，準確判斷問題的能力，屬于考綱識記和理解層次的考查．