Question

8．已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，該疫苗生產和抗體制備的部分流程如圖．

請回答：
（1）①代表的是逆轉錄過程．為獲得A基因表達載體，需用同種限制性核酸內切酶對A基因和運載體進行酶切．除質粒外，噬菌體（或“動植物病毒”）也可作為運載體．將A基因表達載體導入動物細胞的常用方法是顯微注射法．
（2）為獲得A基因，還可根據A蛋白的氨基酸序列，推測出A蛋白的基因序列，據此可利用化學方法合成A基因．
（3）過程③采用的實驗技術是動物細胞融合，獲得的X叫雜交瘤細胞．單克隆抗體與常規的血清抗體相比，最大的優越性是特異性強、靈敏度高，并可能大量制備．
（4）對健康人進行該傳染病免疫預防時，可選用圖中的A蛋白制備疫苗．對該傳染病疑似患者確診時，可以用圖中的抗A蛋白的單克隆抗體進行特異性結合檢測．

Answer 1

分析 結合題意分析圖解得，①表示逆轉錄過程，②表示目的基因的獲取，③是細胞融合，得到的是雜交瘤細胞X．
動物細胞融合是指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程，最主要的用途是制備單克隆抗體．單克隆抗體的制備必須用已免疫的B淋巴（效應B淋巴）細胞和骨髓瘤細胞融合，經2次篩選才能選出產生所需單一抗體的雜交瘤細胞，然后要用動物細胞培養技術在體外液體培養基中培養．

解答 解：（1）從圖中分析可知，A基因是從病毒提取的RNA，經逆轉錄產生DNA后獲得的．所以過程①代表的是逆轉錄．為獲得A基因表達載體，需用同種限制性核酸內切酶對A基因和運載體進行酶切．除質粒外，噬菌體、動植物病毒也可作為運載體．將A基因表達載體導入動物細胞的常用方法是顯微注射法．
（2）為獲得A基因，還可根據A蛋白的氨基酸序列，推測出A蛋白的基因序列，據此可利用化學方法合成A基因．
（3）圖中將已免疫的效應B細胞和骨髓瘤細胞通過細胞融合，然后經過兩次篩選獲得能產生特異性抗體的雜交瘤細胞．單克隆抗體與常規的血清抗體相比，最大的優越性是 特異性強、靈敏度高，并可能大量制備．
（4）通過注射疫苗，可能進行傳染病免疫預防．所以用A蛋白制作的疫苗，注射到健康人體內，可以進行該傳染病的免疫預防．對該傳染病疑似患者確診時，可用抗A蛋白的單克隆抗體進行特異性結合來檢測．
故答案為：
（1）逆轉錄     限制性核酸內切     噬菌體（或“動植物病毒”）     顯微注射法
（2）氨基酸
（3）動物細胞融合    雜交瘤     特異性強、靈敏度高，并可能大量制備
（4）A蛋白　    抗A蛋白的單克隆抗體

點評 本題難度中等，考查了基因工程、動物細胞工程的相關知識，要求考生了解基因工程的操作步驟，了解動物細胞工程在生產實踐中的運用，掌握單克隆抗體的制備過程．