Question

5．科學家將人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達，操作過程如圖所示．已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是一↓GATC一．請根據材料回答下列問題：

（1）過程①獲取目的基因的方法是反轉錄法．根據圖示分析，在構建基因表達載體過程中，應用限制酶Ⅰ切割質粒，用限制酶Ⅱ切割目的基因．
（2）將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有氨芐青霉素的培養基上，若能夠生長的，則說明已導入了普通質粒或重組質粒，反之則沒有導入．
（3）若是培育轉基因植物，則常用農桿菌轉化法，將重組質粒導入受體細胞中．

Answer 1

分析 根據題意和圖示分析可知：圖示表示利用基因工程培育抗蟲棉過程，其中①表示通過人工合成法獲取目的基因；②表示基因表達載體的構建過程，該過程需要限制酶和DNA連接酶；③表示將目的基因導入受體細胞．

解答 解：（1）圖中①表示采用反轉錄法（人工合成法）獲取目的基因；由于限制酶Ⅰ的識別序列和切點是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是-↓GATC-，所以在構建基因表達載體過程中，要用限制酶Ⅰ切割質粒，用限制酶Ⅱ切割目的基因．
（2）用限制酶Ⅰ切割質粒后會破四環素抗性基因，不會破壞氨芐青霉素抗性基因，因此能在含氨芐青霉素的培養基上生存的大腸桿菌已經成功導入普通質粒或重組質粒，反之則說明沒有導入．
（3）將目的基因導入植物細胞常用農桿菌轉化法，其中農桿菌的作用是感染植物，將目的基因轉移到受體細胞中．
故答案為：
（1）反轉錄法（人工合成法）ⅠⅡ
（2）氨芐青霉素   普通質粒或重組質粒
（3）農桿菌轉化

點評 本題結合轉基因棉花培育過程圖，考查基因工程、植物組織培養等知識，要求考生識記基因工程的工程及操作步驟，能根據限制酶識別序列選擇合適的限制酶，并能準確判斷圖中各過程的名稱，再結合所學的知識準確答題．