Question

2．有關平板劃線操作不正確的是（　　）

• A． 將接種環直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可迅速徹底滅菌
• B． 在挑取菌種前和接種完畢后均要將試管口通過火焰
• C． 除最后一次劃線后以外，每次劃線前后都要對接種環進行滅菌
• D． 最后將平板倒置，放入恒溫箱中培養

Answer 1

分析 劃線分離操作中的有關問題：
（1）在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環，在劃線操作結束時，仍然需要灼燒接種環．

	第一次灼燒	每次劃線之前灼燒	劃線結束灼燒
目的	避免接種環上可能存在的微生物污染培養基	殺死上次劃線結束后接種環上殘留的菌種	殺死接種環上殘留的菌種，避免細菌污染或感染操作者

②在灼燒接種環之后，要等其冷卻后再進行劃線，以免接種環溫度太高，殺死菌種．
③在進行第二次以及其后的劃線操作時'要從上一次劃線的末端開始劃線．每次劃線后，線條末端細菌的數目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數目隨著劃線次數的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落．
（2）進行恒溫培養時，要將培養皿倒置的原因如果正放培養皿，則皿蓋上形成的水滴會落入培 養基表面并且擴散開．如果培養皿中已形成菌落，則茵落中的細菌會隨水擴散，菌落間相互影響，很難再分成單菌落，達不到分離的目的．因此恒溫培養時，培養皿必須倒置．
（3）培養后判斷是否有雜菌污染的方法
①從菌落的形態看，是否濕潤、透明、黏稠，呈何種顏色等等，是區別細菌、酵母菌、放線菌和霉菌的關鍵指標．
②用顯微鏡鏡檢觀察其形態、大小，看是否有菌絲、孢子、芽孢等，這也是區別細菌、酵母菌、放線菌和霉菌的關鍵指標．

解答 解：A、將接種環直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可迅速徹底滅菌，A正確；
B、在挑取菌種前和接種完畢后均要將試管口通過火焰，B正確；
C、每次劃線前后都要對接種環進行滅菌，最后一次劃線后也要進行滅菌，C錯誤；
D、最后將平板倒置，放入恒溫箱中培養，D正確．
故選：C．

點評 本題考查微生物的培養和分離，要求考生識記平板劃線法的具體操作過程，掌握該過程中需要注意的細節問題，能結合所學的知識準確判斷各選項．