Question

4．丹參酮是從中藥丹參中提取的具有抗腫瘤活性的脂溶性菲醌化合物，其作用機制之一是誘導細胞凋亡．以下是相關的實驗研究過程及結果：
實驗材料：人肝癌細胞（HepG2），培養液，W溶液（作為溶劑），用W溶液溶解的0.5ug/mL、1ug/mL、1.5ug/mL的丹參酮溶液，培養瓶等．
步驟如下：
①將等量的人肝癌細胞（HepG2）懸液，分別接種于若干含有等量培養液的培養瓶中；將培養瓶放于適宜條件下培養24h，靜置、去掉上清液；
②_ _ _，再加入等量的培養液，于相同且適宜的條件下繼續培養；
③培養72h，每24h 用細胞計數儀檢測癌細胞數．
請完善上述實驗步驟中相關內容：
（1）本實驗的自變量是丹參酮的濃度與作用時間．實驗驗中，每組細胞培養瓶不止一個，統計后統計后求平均值，目的是減小誤差．
（2）設對照組癌細胞增殖率為 100%，用下面公式計算各給藥組癌細胞增殖率：
增殖率（% ）=[（給藥組各時段癌細胞數-給藥組開始癌細胞數）：（對照組各時段癌細胞數-對照組開始癌細胞數）]×100．得到如表數據：
表1  丹參酮  對HepG2細胞增殖率的影響%

組別		培養時間/h
		24	48	72
對照組		100	100	100
100給藥組ug/mL	0.5 1.0 1.5	78 68 48	62 26 12	48 21 5

通過數據分析可以得出丹參酮對HepG2細胞的作用效果的特點是：丹參酮濃度越高，對細胞生長的抑制作用越強和作用時間越長，對細胞生長的抑制作用越強
（3）將培養48h的培養液離心，去除上清液后經過一系列的處理及分析，得到對照組和給藥組48h細胞周期變化、凋亡率及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表達量如表所示：

組別	G1	S	G2+M	凋亡率	bax	Bcl-2
對照組	55%	36%	9%	5.6%	28%	53%
實驗組	67%	24%	9%	32.6%	37%	38%

據此推測，丹參酮使HepG2細胞周期阻滯于G₁期．丹參酮可能通過促進HepG2內bax基因的表達來誘導細胞凋亡從而抑制腫瘤的生長．
（4）順鉑（DDP）是一種DNA損傷藥物，也是目前臨床上多種癌癥化療的首選藥物．若要探究丹參酮聯合順鉑對HepG2細胞生長的影響，應還需設置順鉑用藥組和丹參酮聯合順鉑用藥組給藥組才能得出結論．

Answer 1

分析 1、一般在探究實驗中，要遵循單一變量和對照性原則，同時無關變量要保持相同且適宜．
2、分析實驗設置可知，實驗的自變量為丹參酮的濃度與作用時間，而人肝癌細胞的數量、培養時間、溶液的用量等都屬于無關變量．

解答 解：（1）根據表格可知，本實驗的自變量是丹參酮的濃度和作用時間．該實驗需要遵循平行重復原則，即每組細胞培養瓶不止一個，統計后求平均值，目的是減少誤差．
（2）通過數據和柱形圖分析可知，丹參酮濃度越高，對細胞生長的抑制作用越強；作用時間越長，對細胞生長的抑制作用越強．
（3）由表格中數據看出，實驗組的G₁期細胞比例增多，S期的細胞比例減少，因此可以推測丹參酮使HepG2細胞周期阻滯于G₁期．表格中凋亡蛋白Bax表達量增多時，細胞的凋亡率也增加，因此可以推測丹參酮可能通過促進HepG2內的bax基因表達來誘導細胞凋亡從而抑制腫瘤的生長．
（4）若要探究丹參酮聯合順鉑對HepG2細胞生長的影響，應還需設置順鉑用藥組和丹參酮聯合順鉑用藥組給藥組才能得出結論．
故答案為：
（1）丹參酮的濃度與作用時間   統計后求平均值
（2）丹參酮濃度越高，對細胞生長的抑制作用越強；作用時間越長，對細胞生長的抑制作用越強
（3）G₁    bax基因
（4）順鉑用藥組     丹參酮聯合順鉑用藥組

點評 本題考查惡性腫瘤防治、動物細胞培養等有關知識，要求考生具有一定的分析能力和實驗設計能力；能夠對實驗的表格進行分析，并能夠得出相關實驗結論，難度適中．