Question

基因工程又叫基因拼接技術．
（1）在該技術中，用人工合成方法獲得目的基因的途徑之一是：以目的基因轉錄的

 

為堡板，

 

成互補的單鏈DNA，然后在酶的作用下合成

 

．
（2）基因工程中常用的受體細胞有細菌、真菌

 

．若將真核基因在原核細胞中表達，對該目的基因的基本要求是

 

．
（3）假設以大腸桿菌質粒作為運載體，并以同一種限制性內切酶切割運載體與且的基因，將切割后的運載體與目的基因片段混合，并加入DNA連接酶．連接產物至少有

 

種環狀DNA分子，它們分別是

 

．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：基因拼接技術一般要經過四個步驟：一是獲取目的基因，二是目的基因與運載體結合，三是將目的基因導入受體細胞，四是目的基因的檢測與表達．
獲得目的基因的方法：①從基因文庫中獲取  ②利用PCR技術擴增  ③人工合成（化學合成）．人工合成目的基因有兩種方法：一是通過mRNA→單鏈DNA→雙鏈DNA；二是根據蛋白質氨基酸序列→mRNA序列→推測出結構基因核苷酸序列→通過化學方法人工合成．

解答： 解：（1）目的基因的獲取主要有兩種途徑，一是從供體細胞的DNA中直接分離基因，二是人工合成基因．人工合成的方法之一有反轉錄法，即以目的基因轉錄的mRNA為模板，逆轉錄成互補的單鏈DNA，然后在酶的作用下合成雙鏈DNA（目的基因）．
（2）由于真核生物基因中有不表達的核苷酸序列（內含子），所以要想真核生物的基因在原核細胞中表達，就必須除去目的基因中的內含子．
（3）由于同種限制酶切割形成的粘性末端相同，因此目的基因和運載體上具有相同的粘性末端．當把切割后的運載體與目的基因放在一起，并加入DNA連接酶，將會出現3種環狀的DNA分子，即運載體自連的、目的基因片段自連的、運載體與目的基因片段相連的環狀DNA分子．
故答案為：
（1）信使RNA（mRNA）逆轉錄（反轉錄）    雙鏈DNA（目的基因）
（2）動植物細胞  除去內含子
（3）3  運載體自連的、目的基因片段自連的、運載體與目的基因片段相連的環狀DNA分子

點評：本題考查了基因工程的相關知識，意在考查考生的識記能力和理解能力，并能將所學知識構成一定的知識網絡，難度適中．