Question

2．Rag₂基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞．科研人員利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)Rag₂基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療．其技術(shù)流程如圖．下列操作錯(cuò)誤的是（　�。�

• A． 為了獲得更多的卵母細(xì)胞，需用促性腺激素對(duì)供體進(jìn)行處理
• B． 步驟①中，在核移植前應(yīng)去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核
• C． 步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到原腸胚期時(shí)，可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出ES細(xì)胞
• D． 為檢測(cè)Rag2基因的表達(dá)情況，可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì)，用抗Rag2蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)

Answer 1

分析 1、動(dòng)物核移植的概念：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體．
2、胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱(chēng)ES或EK細(xì)胞，來(lái)源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）．
3、在基因工程中，目的基因和質(zhì)粒需要用同種限制酶進(jìn)行切割，形成相同的黏性末端，再用DNA連接酶連接成重組質(zhì)粒．
4、目的基因分子水平上的檢測(cè)：
①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)
②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)
③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)
分析題圖：圖示是利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療的流程，其中①表示獲得重組胚胎的過(guò)程；②表示早期胚胎培養(yǎng)過(guò)程；③表示采用基因工程技術(shù)將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞．

解答 解：A、為了獲得更多的卵母細(xì)胞，需用促性腺激素對(duì)供體進(jìn)行處理使其排出更多的卵細(xì)胞，A正確；
B、核移植是將體細(xì)胞核移植到去核的卵母細(xì)胞中，所以實(shí)驗(yàn)前要去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核，B正確；
C、步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí)，可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出ES細(xì)胞，C錯(cuò)誤；
D、為檢測(cè)目的基因的表達(dá)情況，可采用抗體-抗原雜交技術(shù)，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已成功表達(dá)，D正確．
故選：C．

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療的流程圖，綜合考查基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記細(xì)胞工程的操作步驟及相關(guān)細(xì)節(jié)；識(shí)記核移植技術(shù)的過(guò)程及應(yīng)用；識(shí)記胚胎干細(xì)胞的來(lái)源及特點(diǎn)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．