Question

13．癌癥干細胞理論認為，“癌癥干細胞”是癌細胞發展、轉移和治療后復發的根源．實驗發現，如果恢復“癌癥干細胞”中的“let-7基因”的轉錄，“癌癥干細胞”的自我增殖能力將顯著下降，原理如圖．請分析回答：

（1）在培養“癌癥干細胞”時，培養液中應加入一定量的抗生素以防止污染．為避免細胞代謝產物積累對自身造成的危害，應采取的措施是定期更換培養液．培養過程中可使用胰蛋白（膠原蛋白）酶處理貼壁細胞，以便分瓶進行傳代培養．
（2）“let-7基因”恢復轉錄的原因可能是通過修飾RNA聚合酶識別和結合的位點，使之恢復驅動“let-7基因”的轉錄功能；用分子雜交法可直接檢測“let-7基因”是否轉錄，當“let-7基因”恢復轉錄時，“癌癥干細胞”中核糖體的活動減弱（填“不變”、“增強”或“減弱”）；“癌癥干細胞”的自我增殖能力下降的原因可能是癌蛋白（填“癌基因mRNA”或“癌蛋白”）減少．

Answer 1

分析 圖表示let-7基因影響癌基因的表達的原理，let-7基因轉錄產物miRNA與癌基因轉錄產物mRNA結合，使癌基因翻譯受到抑制，引起細胞中的癌基因蛋白含量減少，進而導致癌細胞增殖受到抑制．

解答 解：（1）動物細胞培養過程要保持無菌無毒環境：在細胞培養液中添加一定量的抗生素，保持無菌環境．定期更換培養液，防止細胞代謝產物積累對自身造成危害，保持無毒調節．動物細胞培養過程中出現接觸抑制后可以用胰蛋白酶處理，使之分散成單個的細胞，之后分裝到其他培養瓶里面進行傳代培養．
（2）啟動子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶識別和結合的位點，RNA聚合酶結合到該位點，可驅動轉錄過程．判斷目的基因是否在受體細胞中轉錄，可用分子雜交技術來檢測，從細胞中提取mRNA和用放射性同位素或者熒光標記的目的基因單鏈DNA片段進行雜交．根據題中信息“如果恢復“癌癥干細胞”中的“let-7基因”的轉錄，“癌癥干細胞”的自我增殖能力將顯著下降”知，let-7基因轉錄后，癌細胞的增殖受到抑制；據圖可知，let-7基因轉錄產物miRNA與癌基因轉錄產物mRNA結合，使癌基因翻譯受到抑制，引起細胞中的癌基因蛋白含量減少，進而導致癌細胞增殖受到抑制．
故答案為：
（1）抗生素   定期更換培養液   胰蛋白（膠原蛋白）  傳代
（2）RNA聚合   分子雜交   減弱  癌蛋白

點評 本題考查基因工程的原理和技術、遺傳信息的轉錄和翻譯的相關知識，要求考生識記基因工程的工具和操作步驟．要求能分析圖1，準確判斷各過程的名稱；掌握遺傳信息的轉錄和表達過程，并能利用圖信息答題．