Question

分析有關生物工程的資料，回答問題．
（1）新技術的建立和應用對生物學發展至關重要．下列技術（或儀器）與應用匹配正確的是

 

①PCR技術--擴增蛋白質
②雜交瘤技術--制備單克隆抗體
③光學顯微鏡--觀察葉綠體的基粒
④花粉離體培養--培育單倍體植物
A．①②B．③④C．①③D．②④
紅細胞生成素（EPO）是體內促進紅細胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病由于天然EP0來源極為有限，目前臨床使用的紅細胞生成素主要來自于基因工程技術生產的重組人紅細胞生成素（rhEPO），其生產流程如圖：
（2）本生產流程中要得到的目的基因是

 

；受體細胞是

 

．圖中②所指的物質是

 

，③所指的物質是

 

．
（3）流程圖中顯示獲取目的基因的途徑有二條：通過①

 

技術和從

 

中獲取．將該基因的表達載體導入受體細胞常采用的方法是

 

．
（4）本流程圖中還涉及到的一項細胞工程技術是

 

．培養重組CHO 細胞時，為便于清除代謝產物，防止細胞產物積累對細胞自身造成危害，應定期更換

 

．
（5）檢測rhEPO外活性需用抗rhEPO單克隆抗體．分泌單克隆抗體的

 

細胞，可由

 

免疫過的小鼠B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合而成．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術,動物細胞與組織培養過程,單克隆抗體的制備過程

專題：

分析：分析題圖：圖示是利用基因工程技術生產人細胞生成素的過程，首先獲取目的基因（人EPO基因），可從人的胚胎干細胞中獲取，其中①表示采用PCR技術體外擴增，也可以人工合成法獲取，其中②為mRNA；其次構建基因表達載體；再將基因表達載體導入受體細胞（中國倉鼠細胞）；最后進行目的基因的檢測和篩選，再大規模．

解答： 解：（1）①PCR技術--擴增DNA，①錯誤；
②雜交瘤技術（動物細胞融合技術）--制備單克隆抗體，②正確；
③葉綠體的基粒屬于亞顯微結構，用光學顯微鏡觀察不到，③錯誤；
④單倍體是由配子直接發育而來的，因此花粉離體培養可以獲得單倍體植物，④正確．
故選：D．
（2）由圖可知，目的基因是人EPO基因（控制紅細胞生成素合成的基因）；受體細胞是中國倉鼠卵巢細胞；圖中②是mRNA；③是目的基因的表達產物，即rhEPO．
（3）由圖可知，獲取目的基因的途徑有二條：通過①PCR技術和從cDNA文庫中獲取．顯微注射法是將目的基因導入動物細胞最有效的方法．
（4）大規模培養重組CHO細胞還需采用動物細胞培養技術．動物細胞培養時，需要無菌、無毒的環境，為便于清除代謝產物，防止細胞產物積累對細胞自身造成危害，應定期更換培養液．
（5）rhEPO免疫過的小鼠B淋巴細胞能分泌抗體，但不能在體外無限增殖，小鼠骨髓瘤細胞不能分泌抗體，但能無限增殖，由rhEPO免疫過的小鼠B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合而成的雜交瘤細胞，既可分泌單克隆抗體，也可無限增殖．
故答案為：
（1）D
（2）人EPO基因（控制紅細胞生成素合成的基因）   中國倉鼠卵巢細胞     mRNA    rhEPO
（3）PCR    cDNA文庫    顯微注射法
（4）動物細胞培養技術    培養液
（5）雜交瘤     rhEPO

點評：本題結合利用基因工程技術生產人紅細胞生成素的過程圖，考查基因工程的原理及技術、動物細胞培養、單克隆抗體等知識，要求考生識記基因工程的操作步驟，能準確判斷圖中各過程或物質的名稱；識記動物細胞培養的過程及條件；掌握單克隆抗體的制備原理．