Question

一種重癥聯合免疫缺陷病（簡稱SCID），這種患者缺乏正常的人體免疫功能，只要稍被細菌或病毒感染，就會發病死亡．經研究證實，SCID病人細胞的一個常染色體上編碼腺苷酸脫氨酶（簡稱ADA）的基因ada發生了突變．目前，人們已經找到了治療該疾病的方案．如圖：
（1）此圖過程中用到的運載體是

 

．
（2）運載體必須具備的條件是

 

（多選）
A．能在宿主細胞中復制并保存  
B．具有多個限制酶切點，以便與外源基因連接
C．具有標記基因，便于進行篩選       
D．是環狀形態的DNA分子
（3）檢測ADA基因在血細胞中是否轉錄的方法是

 

．
（4）血細胞培養過程中要選擇

 

代以內的細胞，以保持

 

．
（5）圖中的治療方法是

 

（體內或體外）基因治療法．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術,動物細胞與組織培養過程

專題：

分析：作為運載體必須具備的條件：①要具有一個或多個限制酶的切割位點；②要有標記基因（如抗性基因），以便于重組后重組子的篩選；③能在宿主細胞中穩定存在并復制；④是安全的，對受體細胞無害，而且要易從供體細胞分離出來．

解答： 解：（1）分析圖解可知，圖中將ADA基因整合到逆轉錄病毒的核酸中，因此該過程中用到的運載體是逆轉錄病毒．
（2）作為運載體必須具備的條件：①能在宿主細胞中穩定存在并復制；②要具有一個或多個限制酶的切割位點；③要有標記基因（如抗性基因），以便于重組后重組子的篩選；④是安全的，對受體細胞無害，而且要易從供體細胞分離出來．故選ABC．
（3）檢測ADA基因在血細胞中是否轉錄的方法是分子雜交技術．
（4）原代培養細胞傳至10代左右就不容易傳下去，細胞生長停滯，大部分細胞衰老死亡，少數細胞能存活傳到40～50代．因此血細胞培養過程中要選擇10代以內的細胞，以保持正常的二倍體核型，保證供體細胞正常的遺傳基礎．
（5）圖中的治療方法是體外基因治療法．
故答案為：
（1）逆轉錄病毒
（2）ABC
（3）分子雜交技術
（4）10    正常的二倍體核型，保證供體細胞正常的遺傳基礎
（5）體外

點評：本題以體外基因治療的流程圖為載體，考查了基因工程和動物細胞培養的有關知識，要求考生能夠識記基因工程的操作工具以及操作步驟；掌握目的基因檢測與鑒定的方法等，難度適中．