Question

圖為某種質粒表到載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，   amp^R為青霉素抗性基因，tct^R 為四環素抗性基因，P啟動子，T為終止子，ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內的多種酶的酶切位點。

據圖回答：

（1）將含有目的基因的DNA與質粒該表達載體分別用EcoRI酶切，酶切產物用DNA連接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產物有       、         、   

      三種 。若要從這些連接產物中分離出重組質粒，需要對這些連接產物進行        。

（2）用上述3種連接產物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉化實驗。之后將這些宿主細胞接種到含四環素的培養基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產物是         ；花接種到含青霉素培養基中，能生長的原核宿主細胞所含的連接產物是         ；

（3）目的基因表達時，RNA聚合酶識別和結合的位點是        ，其合成的產物是      ；

（4）在上述實驗中，為了防止目的基因和質粒表達載體在酶切后產生的末端發生任意連接，酶切時應選用的酶是                。

Answer 1

（1）目的基因-載體連接物  載體-載體連接物  目的基因-目的基因連接物

   分離純化    （其他合理答案也給分）

（2）載體-載體連接物    目的基因-載體連接物   載體-載體連接物

（3）啟動子  mRNA 

（4）RcoRI 和BamHI  （只答一個酶不給分）