Question

圖為某種質(zhì)粒表到載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點(diǎn)，amp^R為青霉素抗性基因，tct^R為四環(huán)素抗性基因，P啟動子，T為終止子，ori為復(fù)制原點(diǎn)。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)。
據(jù)圖回答：

（1）將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒該表達(dá)載體分別用EcoRI酶切，酶切產(chǎn)物用ＤＮＡ連接酶進(jìn)行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有      、        、   
     三種 。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒，需要對這些連接產(chǎn)物進(jìn)行       。
（2）用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。之后將這些宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是        ；
（3）在上述實(shí)驗(yàn)中，為了防止目的基因和基因和質(zhì)粒表達(dá)載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應(yīng)選用的酶是               。

Answer 1

（１）目的基因－載體連接物　　載體－載體連接物　目的基因－目的基因連接物　　　　分離純化（每空２分，共８分）
（２）載體－載體連接物（２分）　　目的基因－載體連接物（１分）　　載體－載體連接物（１分）
（３）啟動子　　mRNA (每空２分，共４分)
（４）EcoRI和BamHI（２分）（只答一個酶不給分）

解析