Question

圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度（bp即堿基對）和部分堿基序列，圖2表示一種質粒的結構和部分堿基序列．現有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4種限制性核酸內切酶，它們識別的堿基序列和酶切位點分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG．下列分析中正確的是（　　）

• A、若用限制酶MspⅠ完全切割圖1中DNA片段，會破壞2個磷酸二酯鍵
• B、若圖1虛線方框內的堿基對被T-A替換，那么基因D就突變為基因d，用限制酶SmaⅠ完全切割雜合子個體中圖1的DNA片段，會產生3種不同的DNA片段
• C、若需切割圖2中的質粒以便于拼接目的基因D，應選擇限制酶BamHⅠ和MboⅠ
• D、若用上述條件構建含有目的基因D的重組質粒并成功導入細菌體內，則此細菌在添加抗生素A和B的培養基中不能存活

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：分析圖1：圖中DNA片段含有2個限制酶SmaⅠ切割位點，可被限制酶SmaⅠ切割產生長度為534+3=537bp、796-3-3=790bp、658+3=661bp的三種DNA片段．基因D兩側序列為GGATCC，可被限制酶BamHⅠ切割；分析圖2：用限制酶BamHⅠ切割破壞了抗生素A抗性基因．GGATCC序列和GATC序列可被限制酶MboⅠ切割，用限制酶MboⅠ切割質粒后，破環抗生素A、B抗性基因，因此含有重組質粒的大腸桿菌不能抗生素B，也不能抗抗生素A．

解答： 解：A、若用限制酶MspⅠ完全切割圖1中DNA片段，會破壞4個磷酸二酯鍵，A錯誤；
B、從雜合子（Dd）分離出圖1及其對應的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，產物中共有4種不同DNA片段，B錯誤；
C、目的基因兩側是GGATCC序列，該序列是限制酶BamHⅠ的識別序列，因此要將質粒和目的基因D連接形成重組質粒，所以應選用限制酶BamHⅠ切割，C錯誤；
D、用限制酶BamHⅠ切割破壞了抗生素A抗性基因，用限制酶MboⅠ切割質粒后，破環抗生素A、B抗性基因，此細菌在添加抗生素A和B的培養基中不能存活，D正確．
故選：D．

點評：本題考查基因工程操作的相關知識，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點的能力；能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結論的能力．