Question

16．圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度（bp即堿基對）和部分堿基序列，圖2表示一種質粒的結構和部分堿基序列．現有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4種限制性核酸內切酶，它們識別的堿基序列和酶切位點分別為：C↓CGG、G↓GATCC．↓GATC．CCC↓GGG．下列分析中正確的是（　　）

• A． 若用限制酶MspⅠ完全切割圖1中DNA片段，會破壞2個磷酸二酯鍵
• B． 若圖1所示DNA虛線方框內的堿基對被T-A替換，用限制酶SmaⅠ完全切割后會產生3種不同的DNA片段
• C． 若切割圖2中的質粒以便拼接目的基因D應選擇限制酶 BamHⅠ和MboⅠ
• D． 若用上一選項中的條件構建含有目的基因D的重組質粒并成功導入細菌體內，則此細菌在添加抗生素A和B的培養基中不能存活

Answer 1

分析 根據題意和圖示分析可知：圖1中：DNA片段含有2個限制酶MspⅠ切割位點，可被限制酶MspⅠ切割產生長度為534+2=536bp、796-2-2=792bp、658+2=660bp的三中DNA片段．基因D兩側序列為GGATCC，可被限制酶BamHⅠ切割．
圖2中：質粒含有CCGG序列、GGATCC序列和GATC序列，其中CCGG序列可被限制酶MspⅠ切割，GGATCC序列和GATC序列可被限制酶MboⅠ切割．用限制酶BamHⅠ切割破壞了抗生素A抗性基因，但沒有破環抗生素B抗性基因，因此含有重組質粒的大腸桿菌能抗抗生素B，但不能抗抗生素A．

解答 解：A、由于限制酶MspⅠ識別的堿基序列和酶切位點為C↓CGG，在圖1DNA片段中有2個，因而若用限制酶MspⅠ完全切割圖1中DNA片段，會破壞4個磷酸二酯鍵，A錯誤；
B、若圖1所示DNA虛線方框內的堿基對被T-A替換后，該段堿基序列不能被限制酶SmaⅠ識別，所以用限制酶SmaⅠ完全切割后只會產生2種不同的DNA片段，B錯誤；
C、限制酶MspⅠ和SmaⅠ的切割位點位于目的基因D上，若用這兩種酶切割會被破壞目的基因D；運載體的兩個標記基因上都有限制酶MboⅠ的切割位點，用該酶切割會破壞這兩個標記基因，因此只能選用限制酶BamHⅠ切割外源DNA分子和運載體，C錯誤；
D、若用上述條件構建含有目的基因D的重組質粒并成功導入細菌體內，由于破壞了抗生素A抗性基因，所以此細菌在添加抗生素A和B的培養基中不能存活，D正確．
故選：D．

點評 本題考查基因工程操作的相關知識，意在考查學生的識記能力和理解所學知識要點的能力；能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結論的能力．