Question

9．關于凝膠色譜柱的裝填，除哪項外均為正確解釋？（　　）

• A． 交聯葡聚糖凝膠（Sephadex G-75）“G”表示凝膠的交聯程度、膨脹程度及分離范圍，75表示凝膠得水值
• B． 色譜柱內不能有氣泡存在，一旦發現有氣泡，必須重裝
• C． 用300mL物質的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液充分洗滌平衡凝膠12h
• D． 凝膠用自來水充分溶脹后，配成凝膠懸浮液

Answer 1

分析 凝膠色譜法是根據相對分子質量的大小來分離蛋白質的有效方法，相對分子質量小的蛋白質容易進入凝膠內部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質量大的蛋白質不容易進入凝膠內部的通道，路程短，移動的速度快，因此相對分子質量不同的蛋白質得以分離．
裝填凝膠色譜柱時，色譜柱內不能有氣泡存在，因為氣泡會擾亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序，降低分離效果．

解答 解：A、交聯葡聚糖凝膠（Sephadex G-75）G表示凝膠的交聯程度，膨脹程度及分離范圍，75表示凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時吸水7.5克，A正確；
B、色譜柱內不能有氣泡，一旦發現氣泡，必須重裝，B正確；
C、裝填完后，需用300 mL的物質的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液（pH=7.0）充分洗滌平衡凝膠12小時，使凝膠裝填緊密，C正確；
D、在配制凝膠懸浮液時，凝膠應用蒸餾水充分溶脹，D錯誤．
故選：D．

點評 本題考查了生物技術與實踐的相關實驗，意在考查學生是理解和應用能力，對色譜柱裝填的方法及蛋白質分離方法的記憶和綜合應用是本題考查的重點．