Question

2．蛋白質的分離與提純技術是研究蛋白質的重要技術，DNA的提取和分離及PCR技術是研究DNA的重要技術．根據所學的知識回答下列問題．
（1）樣品處理，紅細胞的洗滌要用生理鹽水反復沖洗、離心．血紅蛋白粗分離階段，若要盡快達到理想的透析效果，可以采用的方法是加大緩沖液的量或及時更換緩沖液．
（2）分離蛋白質時，用凝膠色譜法將樣品純化的目的是去除相對分子量較大的雜質．
（3）DNA粗提取時，常用雞血作為實驗材料，原因是雞血細胞中紅細胞數目較多且有細胞核，可以提供豐富的DNA．實驗前中，以通過離心和靜置兩種上法使雞血細胞沉淀與試管底部，以便除去血清．實驗中有兩次使用蒸餾水，第一次使用的目的是使血細胞吸水膨脹脹破．
（4）PCR反應過程中的延伸是指在DNA聚合酶的作用下，脫氧核苷酸聚合形成新的DNA單鏈，在PCR技術中所需要的引物實質上是一種單鏈DNA或RNA分子．

Answer 1

分析 血紅蛋白的提取與分離的實驗步驟主要有：（1）樣品處理：①紅細胞的洗滌，②血紅蛋白的釋放，③分離血紅蛋白溶液．（2）粗分離：①分離血紅蛋白溶液，②透析．（3）純化：調節緩沖液面→加入蛋白質樣品→調節緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質．（4）純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳．

解答 解：（1）樣品處理，紅細胞的洗滌要用生理鹽水反復沖洗、離心．血紅蛋白粗分離階段，若要盡快達到理想的透析效果，可以采用的方法是加大緩沖液的量或及時更換緩沖液．
（2）分離蛋白質時，用凝膠色譜法將樣品純化的目的是去除相對分子量較大的雜質．
（3）DNA粗提取時，常用雞血作為實驗材料，原因是雞血細胞中紅細胞數目較多且有細胞核，可以提供豐富的DNA．實驗前中，以通過離心和靜置兩種上法使雞血細胞沉淀與試管底部，以便除去血清．實驗中有兩次使用蒸餾水，第一次使用的目的是使血細胞吸水膨脹脹破．
（4）PCR反應過程中的延伸是指在DNA聚合酶的作用下，脫氧核苷酸聚合形成新的DNA單鏈，在PCR技術中所需要的引物實質上是一種單鏈DNA或RNA分子．
故答案為：
（1）生理鹽水    加大緩沖液的量或及時更換緩沖液
（2）去除相對分子量較大的雜質
（3）雞血細胞中紅細胞數目較多且有細胞核，可以提供豐富的DNA      離心和靜置     使血細胞吸水膨脹脹破
（4）在DNA聚合酶的作用下，脫氧核苷酸聚合形成新的DNA單鏈      單鏈DNA或RNA分子

點評 本題考查蛋白質的提取和分離、DNA的粗提取和鑒定、PCR技術等知識，對于此類試題，需要考生注意的細節較多，如實驗的原理、實驗步驟、實驗采用的試劑及試劑的作用、實驗現象等，需要考生在平時的學習過程中注意積累．