Question

分析有關微生物的資料，回答問題并完善實驗設計方案．
脂肪酶具有廣泛的應用前景．為獲得高產脂肪酶的菌株，并將之用于產業化，進行如下的系列實驗．
（1）欲分離篩選出能分泌脂肪酶的細菌，應選擇下列固體培養基（僅列出了碳氮源）中的

 

．
A．蛋白胨、檸檬酸鐵銨    B．橄欖油、硫酸銨    C．乳糖、酵母膏       D．葡萄糖、蛋白胨
（2）進一步調查適合于產脂肪酶菌株生長的碳氮源．根據表1的實驗數據，選擇理想的碳源為

 

．

表1 不同碳源對菌種產脂肪酶的影響
碳源	濃度（%）	酶活（IU/mL）
玉米粉	1.0	8.50
可溶性淀粉	1.0	0.00
糊精	1.0	28.50
葡萄糖	1.0	2.50
蔗糖	1.0	37.50
麥芽糖	1.0	13.50

（3）補全表2中的實驗方案，以確定所選碳源的最佳濃度（設濃度梯度的差值為0.2%）．

表2
酶活
第1組	/	/	/	/	/
第2組	/	/	/	/	/
第3組	/	/	/	/	/
	/	/	/	/	/

（4）利用相似方法探得理想氮源的最佳濃度，再進一步確定碳氮源濃度的最佳組合．以a和b分別代表碳源和氮源的濃度，假設酶活a₁＞a₂＞a₃；b₂＞b₃＞b₄，據此形成下列四種方案，其中最佳的是

 

．
方案一：a₁和b₂組合．
方案二：將每一種a的濃度分別與b₂、b₃、b₄組合，根據酶活取其中的最佳組合．
方案三：a₁和b₂組合，a₂和b₃組合，根據酶活取其中的最佳組合．
方案四：a₁分別與每種氮源濃度組合，b₂分別與每種碳源濃度組合，根據酶活取其中的最佳組合．
（5）如果脂肪酶的產業化需要其活性在固定化處理時不受損失，且在多次重復使用后仍能維持穩定的酶活，則應選擇圖中的

 

固定化工藝．

Answer 1

考點：酶活力測定的一般原理和方法,制備和應用固相化酶

專題：

分析：分離篩選出能分泌脂肪酶的細菌，有要在培養基中加入該特定的碳氮源，而分泌脂肪酶的細菌能在乳糖、酵母膏生長；題目要求設濃度梯度的差值為0.2%，要根據這一點來設定；題目的要求是確定碳氮源濃度的最佳組合，所以在有碳源，又要有氮源，a和b組合后，就是看出碳源在何種濃度、氮源在何種濃度下生長最合適；由于需要其活性在固定化處理時不受損失，且在多次重復使用后仍能維持穩定的酶活性，圖中只有B組．

解答： 解：（1）分離篩選出能分泌脂肪酶的細菌，有要在培養基中加入該特定的碳氮源，而分泌脂肪酶的細菌能在乳糖、酵母膏生長；
（2）產脂肪酶菌株生長的碳源就是蔗糖；
（3）題目要求設濃度梯度的差值為0.2%，要根據這一點來設定；
（4）題目的要求是確定碳氮源濃度的最佳組合，所以在有碳源，又要有氮源．a和b組合后，就是看出碳源在何種濃度、氮源在何種濃度下生長最合適；
（5）ABC分別對應交聯法、吸附法、包埋法，包埋法由于需要其活性在固定化處理時不受損失，且在多次重復使用后仍能維持穩定的酶活性．
故答案為：（1）B
（2）蔗糖
（3）

（4）方案二
（5）B

點評：本題考查酶活力測定的一般原理和方法，意在考察考生對所學生物學知識的理解能力和分析能力．