Question

20．微生物實驗探究
天然果膠是細胞壁的一種組成成分，能使植物細胞黏連、緊密結合，遇水呈膠狀固體樣物．果膠酶是果膠水解酶，能使果膠分解為溶于水的小分子有機物，廣泛用于水果加工．一些微生物能產生果膠酶；剛果紅染料與果膠加水可以結合成紅色膠狀固體．
為分離、獲取高產果膠酶菌種，科研人員進行了下列實驗工作：
Ⅰ：配置培養基成分：

K2HPO4	MgSO4	NaNO3	FeSO4	X	瓊脂	剛果紅	Y
0.1g	0.5g	3g	0.01g	2g	15g	1g	加至1L

（1）X、Y所代表的成分依次是果膠和水；從功能上看，該培養基屬于鑒別或選擇培養基．
Ⅱ：制備培養基：培養基滅菌；然后在培養皿中制備培養平板．
（2）制備的培養基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌；
Ⅲ：采集菌種：
（3）科研人員一般在果園或果樹下采集土壤；將采集的土壤放入無菌水中震蕩，制成懸液．
Ⅳ：培養、篩選所需菌株
（4）為獲得較均勻分布的單菌落，還需要將懸液進行成倍稀釋，制成系列濃度的懸液；
（5）寫出接下來關鍵的實驗操作步驟：
①接種：采用分區劃線法，用接種針蘸取菌液，接種到培養基上
②培養：蓋上培養皿蓋，在適宜的環境中進行培養
③篩選：在不破壞菌落情況下，先用無菌水輕輕沖洗掉分離出的剛果紅，然后選擇果膠分解圈大、顏色淺或無色中的菌落．

Answer 1

分析 1、微生物培養基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求．對異養微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養要素成分時并不是起單一方面的作用．
2、培養基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養基	培養基中加入某種化學成分	根據某種微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養基	加入某種試劑或化學藥品	依據微生物產生的某種代謝產物與培養基中特定試劑或化學藥品反應，產生明顯的特征變化而設計	鑒別和區分菌落相似的微生物伊紅和美藍培養基可以鑒別大腸桿菌

解答 解：（1）根據題干信息可知，實驗需要分離、獲取高產果膠酶菌種，因此培養基中需要加入果膠，并且需要加水定容至1L．從功能上看，該培養基屬于鑒別或選擇培養基．
（2）制備的培養基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌．
（3）果園或果樹下的土壤中一定會存在該種微生物，因此科研人員一般在果園或果樹下采集土壤．
（4）為獲得較均勻分布的單菌落，還需要將懸液進行成倍稀釋，制成系列濃度的懸液．
（5）關鍵的實驗操作步驟：
①接種：采用分區劃線法，用接種針蘸取菌液，接種到培養基上
②培養：蓋上培養皿蓋，在適宜的環境中進行培養
③篩選：在不破壞菌落情況下，先用無菌水輕輕沖洗掉分離出的剛果紅，然后選擇果膠分解圈大、顏色淺或無色中的菌落．
故答案為：
（1）果膠和水    鑒別或選擇
（2）高壓蒸汽滅菌
（3）果園或果樹下
（4）成倍稀釋，制成系列濃度的懸液．
（5）接種：采用分區劃線法，用接種針蘸取菌液，接種到培養基上    培養：蓋上培養皿蓋，在適宜的環境中進行培養 選擇：果膠分解圈大、顏色淺或無色

點評 本題考查了微生物分離與培養的有關知識，要求考生能夠根據題干信息確定培養基中的類型以及培養基的成分，掌握關鍵的實驗操作步驟，再結合所學知識準確答題．