Question

微生物與人類關系密切，回答有關微生物及其應用的問題：
（1）柴油是一種可再生的清潔能源，其應用在一定程度上能夠減緩人類對化石燃料的消耗．科學家發現，在微生物M產生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇反應能夠合成生物柴油（如圖1）．

①選擇產脂肪酶的微生物M時，培養基中添加的植物油為微生物的生長提供了

 

．
②微生物M分離提取的脂肪酶通常需要檢測

 

來確定其應用價值．為降低生物柴油生產成本，可利用

 

技術使脂肪酶能夠重復使用．
（2）苯酚是工業生產排放的有毒污染物質，自然界中存在著降解苯酚的微生物．研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細菌菌株，篩選的主要步驟如圖2所示，①為土壤樣品．

①圖2中④為對照，微生物在④中不生長、在⑤中生長．④與⑤培養基的主要區別在于

 

；使用

 

法可以在⑥上獲得單個菌落．
②采用固體培養基培養細菌時為什么要倒置培養？

 

．
（3）急性腸胃炎、手足口病分別是由細菌、病毒通過消化道進入人體導致的，因此檢驗飲用水的細菌含量和病毒含量是有效監控疾病發生的必要措施．
①檢驗大腸桿菌的含量時，通常將水樣進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用“涂布器”分別涂布到瓊脂固體培養基的表面進行培養，記錄菌落數量．用該方法統計樣本菌落數時是否需要設置對照組？

 

．為什么？

 

．
②分別取0.1mL已稀釋了10³倍的水樣分別涂布到三個瓊脂固體培養基的表面進行培養，培養基記錄到大腸桿菌的菌落數分別為55、56、57，則每升原水樣中大腸桿菌數為

 

個．
③已知大腸桿菌能發酵乳糖并產酸、產氣．現提供足量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養液和具塞的試管，應如何判斷待檢水樣中是否含有大腸桿菌？

 

．

Answer 1

考點：細胞核的結構和功能,細胞器中其他器官的主要功能,微生物的利用

專題：

分析：閱讀題干可知本題是生物技術與實踐的知識，知識范圍較寬，然后根據問題涉及的具體內容回憶相關知識點，結合問題要求進行回答．

解答： 解：（1）①植物油中不含有礦質元素，植物油由C、H、O三種元素構成，微生物通常以此作為碳源．
②要確定脂肪酶的應用價值，應檢測脂肪酶的活性；由于固定化酶能使能夠重復使用，因而可降低生物柴油生產成本．
（2）①若④是對照組，⑤是實驗組，由于⑤中培養基中苯酚為唯一碳源，微生物在⑤中生長，④培養基中沒有加入苯酚做碳源，在④中不生長；分離菌種獲得單菌落常用的接種方法是稀釋涂布平板法或平板劃線法；采用固體平板培養細菌時，培養基冷卻后形成的水珠滴落在培養基上會污染培養基，所以要將培養皿倒置培養．
（3）①為了準確計數需設置對照組，以便確定培養基是否被雜菌污染，若被污染，則計數結果明顯比實際多．
②三個菌落的平均數=（55+56+57）÷3=56，則每毫升樣品中菌株數=56÷0.1×10³=5.6×10⁵個，所以每升原水樣中的菌株數=5.6×10⁵×10³=5.6×10⁸個．
③由于大腸桿菌發酵乳糖產酸產氣，所以若觀察到有氣泡生成，則說明水樣中有大腸桿菌．
故答案為：
（1）①碳源     ②酶活性   酶的固定化
（2）①、④的培養基中沒有加入苯酚作為碳源，⑤的培養基中加入苯酚作為碳源     平板劃線法（或稀釋涂布平板）
②防止冷卻過程中凝結形成的水珠滴落在培養基上污染培養基
（3）①需要設置    因為需要判定培養基是否被雜菌污染（培養基滅菌是否合格）
②5.6×10⁸個
③通過無菌操作向試管內注入一定量待檢水樣，再注入已滅菌的乳糖蛋白胨培養液將試管充滿，塞上塞子，混勻后置于37℃恒溫箱培養24h．若試管內有氣泡生成的說明水樣中有大腸桿菌

點評：微生物的應用的題目是一類綜合性較強的題目，涉及的知識點比較多，包括微生物的培養和成分的提取，在復習的過程中注意微生物的無菌操作和微生物的分離與培養．