Question

2．為了調查某河流的水質狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌的分離等工作．回答下列問題：
（1）該小組采用下列圖示方法統計樣品活菌數目，該方法叫做稀釋涂布平板法，主要包括梯度稀釋操作和涂布平板操作．在接種前，隨機取若干滅菌后的空平板先行培養了一段時間，這樣做的目的是檢測培養基平板滅菌是否合格．
（2）將1mL水樣按下圖進行操作，從稀釋倍數為10⁶的試管取樣在3個平板上分別接入0.1mL稀釋液；經適當培養后，3個平板上的菌落數分別為39、38和37．據此可得出每升水樣中的活菌數為3.8×10¹¹．當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的1個活菌，一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數．
（3）圖中選擇了10⁴、10⁵、10⁶、10⁷倍的稀釋液進行平板培養，這些平板需要在30～37℃溫度下、pH調至中性或微堿性培養1-2d
（4）該4小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌．操作時，接種環通過灼燒滅菌，在第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線．這樣做的目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落．
（5）該小組將得到的菌株接種到液體培養基中并混勻，一部分進行靜置培養，另一部分進行振蕩培養．結果發現：振蕩培養的細菌比靜置培養的細菌生長速度快．分析其原因是：振蕩培養能提高培養液的溶解氧的含量，同時可以使菌體與培養液充分接觸，提高營養物質的利用率．

Answer 1

分析 本題是對微生物實驗室培養過程中對實驗用品進行滅菌常用的方法及檢測培養基滅菌是否徹底的方法、估算樣品中菌株數的方法、微生物常用的接種方法和具體操作步驟的綜合性考查，回憶微生物實驗室培養過程中對實驗用品進行滅菌常用的方法及檢測培養基滅菌是否徹底的方法、估算樣品中菌株數的方法、微生物常用的接種方法和具體操作步驟，然后解答問題．

解答 解：（1）據圖分析，圖中使用的是稀釋涂布平板法接種和計數的，該方法包括菌液的梯度稀釋和涂布平板接種操作．在接種前，為檢測培養基平板滅菌是否合格需要隨機取若干滅菌后的空平板先行培養一段時間，觀察有無菌落形成．
（2）根據題意，每升水樣中的活菌數為（37+38+39）÷0.1×1000×10⁶=3.8×10¹¹個．平板上的單菌落來源于樣品稀釋液中的1個活菌．計數時一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數．
（3）細菌的最適生長溫度為30～37℃，pH調至中性或微堿性，培養1-2d．
（4）接種時，接種環需要進行灼燒滅菌．在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線的目的是；將聚集的菌體逐漸稀釋分散以便獲得由單個細胞繁殖而來的菌落．
（5）由題意可知，振蕩培養比靜置培養的細菌生長速度快，由此可以說明該細菌是需要菌，由于振蕩培養提高培養液中溶解氧的含量，同時可使菌體與培養液充分接觸，提高營養物質的利用率，細菌生長速度加快．
故答案為：
（1）稀釋涂布平板  梯度稀釋  涂布平板  檢測培養基平板滅菌是否合格　
（2）3.8×10¹¹　1個活菌   30～300　
（3）30～37℃中性或微堿性  
（4）灼燒   將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落　
（5）溶解氧　營養物質

點評 本題考查微生物培養，意在考查考生識記所列知識點，并能運用所學知識做出合理的判斷或得出正確的結論的能力．