Question

20．下列有關基因工程的描述準確的是（　　）

• A． EcoRI可識別GAATTC的序列，并在T和C之間切開
• B． 目的基因的獲得和質粒的切割要用同種限制酶
• C． DNA連接酶可以使目的基因和質粒的氫鍵連接
• D． 只要在受體細胞中發現目的基因，即說明實驗成功

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：A、限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，因此用EcoRI可識別GAATTC的序列，并在G和A之間切開，形成黏性末端，A錯誤；
B、用同種限制酶切割質粒和目的基因可獲得相同的黏性末端，這樣便于目的基因插入運載體，B正確；
C、DNA連接酶可以使目的基因和質粒之間連接形成磷酸二酯鍵，C錯誤；
D、在受體細胞中發現目的基因，只可說明重組質粒已經進入受體細胞，但不能說明目的基因已成功表達，D錯誤．
故選：B．

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟中的相關細節，能結合所學的知識準確判斷各選項，屬于考綱識記和理解層次的考查．