Question

（18分，每空2分）凝乳酶是奶酪生產中的關鍵性酶。直接利用動、植物生產凝乳酶受多種因素限制，培育高酶活力凝乳酶微生物菌種是目前最有前途的發展方向。用紫外線照射芽孢桿菌，分離、培養，并檢測各菌株所產生的凝乳酶活力。操作過程如圖1所示。請分析回答：

（1）圖1所示的b過程的目的是為獲得 ，接種用的平板培養基 （是/不是）選擇培養基。

（2）在一定溫度下（35℃），一定時間內（通常為40分鐘），凝固1mL10%脫脂奶粉的酶量為一個酶活力單位（U）。凝乳酶活力檢測結果如圖2所示。

①據圖2所示，酶催化能力最強的是 組。

②A2、A5組酶活力與A0組芽孢桿菌相同，兩位同學對此做出了推測：

同學甲：A2、A5組芽孢桿菌未發生基因突變，而其他組發生的變化說明基因突變具有 的特點。

同學乙：A2、A5組芽孢桿菌發生基因突變，但凝乳酶蛋白未改變，其依據的理由是 。為了驗證上述2位同學的假設，可采用 技術檢測凝乳酶基因是否發生了突變。

（3）從牛胃液中分離到的凝乳酶以催化能力強而被廣泛應用，研究人員運用基因工程技術，將編碼該酶的基因轉移到了微生物細胞中。

①從牛胃細胞中提取 ，再逆轉錄形成cDNA。以此cDNA為模板PCR擴增目的基因。

②構建重組DNA分子（如圖3所示）最好選用 限制酶。

③研究發現，如果將該凝乳酶20位和24位氨基酸改變為半胱氨酸，其催化能力將提高2倍。通過蛋白質工程生產高效凝乳酶，所需步驟有 。

a. 蛋白質的結構設計 b. 蛋白質的結構和功能分析

c. 蛋白質結構的定向改造 d. 凝乳酶基因的定向改造

e. 將改造后的凝乳酶基因導入受體細胞 f. 將定向改造的凝乳酶導入受體細胞

Answer 1