Question

18．臨床上某些疾病的治療需要器官移植，但是又普遍存在供體器官不足工器官移植后免疫排斥的問題，為了解決這些問題，人們提供了很多設(shè)想，請(qǐng)回答下列問題：
（1）免疫排斥主要是由T細(xì)胞引起的，臨床上通常使用免疫抑制劑藥物來抑制該細(xì)胞的增殖，從而提高器官移植的成功率．
（2）從新生兒臍帶血分離出部分細(xì)胞保存，需要器官移植的時(shí)候進(jìn)行自體移植，在這些細(xì)胞培養(yǎng)液中需加入分化誘導(dǎo)因子，才能培育出需要的器官，但是這些細(xì)胞不同于ES細(xì)胞，因?yàn)镋S細(xì)胞來源于早期胚胎或性腺細(xì)胞，功能上具有發(fā)育的全能性．
（3）利用核移植技術(shù)獲得器官：哺乳動(dòng)物核移植分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植兩種類型，后一種方式可以取病人的體細(xì)胞，注入處于減數(shù)第二次分裂中時(shí)期的次級(jí)卵母細(xì)胞細(xì)胞中，通過電刺激方法促使融合，進(jìn)一步誘導(dǎo)其發(fā)育成特定器官．
（4）利用基因工程提供供體，科學(xué)家正試圖利用基因工程對(duì)小型豬的器官進(jìn)行改造，在改造中導(dǎo)入抑制抗原表達(dá)的基因，通常需要使用的工具酶有限制酶和DNA連接酶，如果已知目的基因的核苷酸排列順序，通常采用逆轉(zhuǎn)錄方法人工合成獲取目的基因，獲取目的基因與載體結(jié)合形成重組DNA分子，將其導(dǎo)入受精卵內(nèi)通常采用顯微注射法技術(shù)，再進(jìn)一步培育成所需的轉(zhuǎn)基因豬．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：
①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；
②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；
③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）免疫排斥主要是細(xì)胞免疫，由T細(xì)胞引起的，T細(xì)胞在胸腺中發(fā)育成熟．臨床上通常使用免疫抑制劑藥物來抑制該細(xì)胞的增殖，
（2）從新生兒臍帶血分離出部分細(xì)胞為造血干細(xì)胞，屬于功能干細(xì)胞，在培養(yǎng)液中加入（分化）誘導(dǎo)因子可以誘導(dǎo)干細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化；ES細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性，體積較小，細(xì)胞核大，核仁明顯，來源于早期胚胎或原始性腺；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物任何一種組織細(xì)胞．
（3）哺乳動(dòng)物核移植分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植兩種類型，前一種方法成功率較高，后一種方式可以取病人的體細(xì)胞，注入處于減數(shù)第二次分裂中時(shí)期的次級(jí)卵母細(xì)胞細(xì)胞中，通過電刺激方法促使融合，進(jìn)一步誘導(dǎo)其發(fā)育成特定器官．
（4）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，通常需要使用的工具酶有限制酶和DNA連接酶，如果已知目的基因的核苷酸排列順序，通常采用逆轉(zhuǎn)錄方法人工合成獲取目的基因，獲取目的基因與載體結(jié)合形成重組DNA分子，將其導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)，動(dòng)物通常采用顯微注射法技術(shù)．
故答案為：
（1）T 
（2）分化誘導(dǎo)  性腺 
（3）胚胎細(xì)胞  減數(shù)第二次分裂中  次級(jí)卵母細(xì)胞 
（4）限制酶和DNA連接酶  逆轉(zhuǎn)錄  重組DNA分子  顯微注射法

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、工具及操作步驟，明確受體細(xì)胞不同時(shí)，導(dǎo)入目的基因的方法也不同，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷解答，屬于考綱識(shí)記層次的考查．