Question

【題目】某科研小組重復教材“觀察DNA和RNA在細胞中的分布”的實驗時發現實驗存在兩大困難：實驗效果不理想，難以出現預期顏色；實驗操作步驟繁瑣復雜。于是他們多次對該實驗做了探索與研究，做出了相關改進（改進實驗結果穩定，效果良好）

Ⅰ．實驗方案：（1）材料用具：人口腔上皮細胞、載玻片、蓋玻片、吸水紙、生理鹽水、顯微鏡。

（2）染色液的配制：略（與教材相同）

（3）實驗步驟：

①在潔凈的載玻片上，滴一滴生理鹽水；

②用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內側壁上輕輕的刮幾下，把牙簽上附有碎屑的一端，放在上述載玻片上的生理鹽水液中涂抹幾下；

③點燃酒精燈，將涂有口腔上皮細胞的載玻片烘干；

④用微量可調移液器吸取 染液，滴加在口腔上皮細胞上，染色3-5分鐘；

⑤小心蓋上蓋玻片，蒸餾水脫色1-2次，用吸水紙吸去多余的水分和染液；

⑥將制作完成的載玻片放置到顯微鏡下觀察。先用低倍鏡觀察選擇染色均勻、色澤 的區域，移至視野中央，將物像調節清晰；換用高倍鏡后，調節 ，直至清楚的觀察到細胞核與細胞

質染色情況。

Ⅱ．補充實驗過程、完善結果

（1）實驗第④步的染液是指___________________。

（2）實驗第⑥步中選擇染色均勻色澤________（“深”，“淺”），換用高倍鏡后，調節________________。

（3）在顯微鏡下會看到人口腔上皮細胞中的_______________被染成綠色，_____被染成紅色，原理是________________________。

（4）依據細胞中顏色分布的不同，可得出的實驗結論是___________________。

Ⅲ．將口腔上皮細胞換為洋蔥鱗片葉內表皮細胞，重復上述試驗，實驗設計如下：（表示進行此項操作，空白處代表不進行此項操作）

實驗操作	第1組	第2組	第3組
在潔凈載玻片上滴加1滴8%HCl
在潔凈載玻片上滴加1滴清水
將一小塊洋蔥鱗片葉表皮置于液滴浸泡5分鐘
反復用蒸餾水清洗材料3次
反復用1%NaHCO3溶液清洗材料3次
用吸水紙將載玻片上液滴吸干
滴加染液染色5分鐘，在顯微鏡下觀察染色效果

（5）結果表明3組實驗均能把細胞核染色，且染色深淺程度依次為___________，這一結果表明8%HCl能夠增加活的洋蔥鱗片葉表皮細胞的細胞膜通透性，但細胞中殘留的HCl會影響染色劑的染色效果，且后者影響更大。

綜上所述，實驗中是否要用HCl處理應依據所選材料而定。若使用HCl處理，一定要注意處理時間不宜過長以免HCl進入細胞核破壞DNA結構，并及時用1%NaHCO3溶液中和殘留的HCl，從而避免細胞內殘留HCl改變染色劑發揮作用的pH值。

Answer 1

【答案】甲基綠吡羅紅混合染液 淺 細準焦螺旋 細胞核 細胞質 ，甲基綠吡羅紅對DNA和RNA的親和力不同，甲基綠使DNA呈現綠色、吡羅紅使RNA呈現紅色 真核細胞的DNA主要分布在細胞核，RNA主要分布在細胞質 第2組＞第3組＞第1組

【解析】

1、實驗原理

①DNA主要分布于細胞核中，RNA主要分布于細胞質中；

②甲基綠和吡羅紅對DNA、RNA的親和力不同：利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細胞染色，可以顯示DNA和RNA在細胞中的分布；

③鹽酸（HCl）能夠改變細胞膜的通透性，加速染色劑進入細胞，同時使染色體中的DNA與蛋白質分離，有利于DNA與染色劑結合。

2、實驗步驟：取口腔上皮細胞，水解，沖洗涂片，染色，觀察。

3、結果和結論：DNA主要分布于細胞核中，RNA主要分布于細胞質中。

Ⅱ（1）觀察DNA和RNA的分布用甲基綠吡羅紅混合染液進行染色。

（2）先用低倍鏡觀察選擇染色均勻、色澤淺的區域，移至視野中央，將物像調節清晰；換用高倍鏡后，調節細準焦螺旋。

（3）由于甲基綠吡羅紅對DNA和RNA的親和力不同，甲基綠使DNA呈現綠色、吡羅紅使RNA呈現紅色，DNA主要分布在細胞核中，RNA主要分布在細胞質中，所以細胞核被染成綠色，而細胞質被染成紅色。

（4）該實驗說明了真核細胞的DNA主要分布在細胞核，RNA主要分布在細胞質

Ⅲ（5）根據結論“8%HCl能夠增加活的洋蔥鱗片葉表皮細胞的細胞膜通透性，但細胞中殘留的HCl會影響染色劑的染色效果，且后者影響更大”，而NaHCO3可以中和鹽酸，因此染色效果最好的是第2組，由于8%HCl影響更大，所以第1組顏色最淺，因此順序是第2組＞第3組＞第1組。