Question

3．如圖表示培育轉熒光蛋白基因克隆豬的流程，請回答有關問題：

（1）過程①表示基因表達載體的構建，其中用到的工具酶有DNA連接酶和限制性核酸內切酶．
（2）過程②最常用的方法是顯微注射法．
（3）該培育流程中涉及的細胞工程技術有動物細胞培養、細胞核移植．
（4）若要同時獲得多頭轉熒光蛋白基因克隆豬，可在桑椹胚或囊胚期進行胚胎分割然后移植，進行該過程時應注意將內細胞團均等分割．

Answer 1

分析 分析題圖：該熒光克隆豬的培育涉及了多項生物工程技術．首先導入目的基因的豬胎兒成纖維細胞要經過動物細胞培養篩選出轉基因體細胞，然后該細胞的細胞核與去核卵細胞進行細胞核移植獲得重組細胞，重組細胞經過早期胚胎培養到桑葚胚或囊胚期，最后經過胚胎移植技術將早期胚胎移植到代孕母豬子宮內，最后生成熒光克隆豬．該過程中利用基因工程、動物細胞培養、細胞核移植、早期胚胎培養和胚胎移植等技術．

解答 解：（1）①表示基因表達載體的構建過程．該過程中首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運載體，其次還需要用DNA連接酶將目的基因與運載體連接形成重組DNA．
（2）目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法．
（3）上述過程中，導入目的基因的豬胎兒成纖維細胞要經過動物細胞培養篩選出轉基因體細胞，然后該細胞的細胞核與去核卵細胞進行細胞核移植獲得重組細胞，重組細胞經過早期胚胎培養到桑葚胚或囊胚期，最后經過胚胎移植技術將早期胚胎移植到代孕母豬子宮內，最后生成熒光克隆豬．其中涉及到的細胞水平現代生物技術主要有動物細胞培養、細胞核移植．
（4）進行胚胎分割時，應選擇發育良好、形態正常的桑椹胚或囊胚．如果對囊胚進行分割時，應對內細胞團均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發育．
故答案為：
（1）基因表達載體的構建     DNA連接酶
（2）顯微注射法
（3）動物細胞培養  細胞核移植
（4）桑椹胚或囊胚    內細胞團

點評 本題結合圖解，考查基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關知識，要求考生識記基因工程的操作工具及操作步驟中，掌握各操作步驟中需要注意的細節；識記動物細胞工程的相關技術及其應用；識記胚胎工程的相關技術及其應用，能正確分析題圖，再結合所學的知識準確答題．