Question

16．近年來(lái)，癌癥等疾病高發(fā)，嚴(yán)重影響著人類健康．
（1）海兔素是從黑斑海兔體內(nèi)分離獲得的一種含溴倍半萜，有學(xué)者以人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549作為體外腫瘤模型，研究了海兔素與TRAIL（腫瘤凋亡誘導(dǎo)因子）對(duì)腫瘤細(xì)胞的作用．如圖1．
①配置動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液，同時(shí)加入胎牛血清，以滿足細(xì)胞代謝所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及調(diào)節(jié)因子．
②將A549置于適宜溫度條件下培養(yǎng)．待細(xì)胞密度達(dá)到90%時(shí)，加入胰蛋白酶，將細(xì)胞分散至單細(xì)胞懸液．
③用一定濃度的海兔素、TRAIL處理上述細(xì)胞懸液后，采用流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)．
實(shí)驗(yàn)中每個(gè)濃度的TRAIL處理下都設(shè)置了對(duì)照，其處理是不添加海兔素，目的是單獨(dú)研究TRAIL對(duì)細(xì)胞存活率的影響（排除海兔素對(duì)細(xì)胞存活率的影響）．根據(jù)結(jié)果可知，在不同條件組合的處理之下，隨著處理濃度的增加，A549腫瘤細(xì)胞的存活率均（有不同程度的）下降，這表明，海兔素能夠增強(qiáng)（填“增強(qiáng)”或“減弱”）TRAIL的抗腫瘤作用．
（2）腫瘤細(xì)胞往往存在對(duì)TRAIL作用的抗性，其主要原因是腫瘤細(xì)胞內(nèi)抗凋亡蛋白基因的高表達(dá)．為進(jìn)一步研究海兔素對(duì)TRAIL抗腫瘤作用的機(jī)制，研究者又進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)．
用凝膠電泳方法測(cè)定相關(guān)蛋白質(zhì)的含量，結(jié)果見(jiàn)圖2（β微管蛋白為對(duì)照）．結(jié)果表明，海兔素可能抑制抗凋亡蛋白基因的表達(dá)，從而減輕其對(duì)TRAIL的抗性．
（3）綜上所述，海兔素對(duì)于癌癥的治療有一定的效果，且這種作用與時(shí)間和劑量呈現(xiàn)出相關(guān)性．

Answer 1

分析 分析圖1：該實(shí)驗(yàn)的自變量有海兔素與TRAIL的濃度，因變量為細(xì)胞存活率，并且每個(gè)不同TRAIL的濃度下都設(shè)置了海兔素為0的空白對(duì)照組．根據(jù)柱形圖中的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，隨著海兔素與TRAIL的濃度的上升，細(xì)胞的存活率均有所下降，可以認(rèn)為海兔素與TRAIL之間具有協(xié)同作用．
圖2中比較不同濃度的海兔素對(duì)抗凋亡蛋白表達(dá)量的影響，與β微管蛋白對(duì)比可知，隨著時(shí)間的推移和海兔素濃度的增加，抗凋亡蛋白表達(dá)量逐漸降低．

解答 解：（1）①動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分．配置動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液，加入胎牛血清，以滿足細(xì)胞代謝所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及調(diào)節(jié)因子．
②原代培養(yǎng)細(xì)胞達(dá)到一定數(shù)目時(shí)會(huì)出現(xiàn)接觸抑制，需要加入胰蛋白酶將細(xì)胞分散至單細(xì)胞懸液，再進(jìn)行傳代培養(yǎng)．
實(shí)驗(yàn)中每個(gè)濃度的TRAIL處理下都設(shè)置了對(duì)照，其處理是不添加海兔素，目的是單獨(dú)研究TRAIL對(duì)細(xì)胞存活率的影響（排除海兔素對(duì)細(xì)胞存活率的影響）．根據(jù)結(jié)果可知，在不同條件組合的處理之下，隨著處理濃度的增加，A549腫瘤細(xì)胞的存活率均（有不同程度的）下降，這表明，海兔素能夠增強(qiáng)TRAIL的抗腫瘤作用．
（2）圖2中比較不同濃度的海兔素對(duì)抗凋亡蛋白表達(dá)量的影響，與β微管蛋白對(duì)比可知，隨著時(shí)間的推移和海兔素濃度的增加，抗凋亡蛋白表達(dá)量逐漸降低，表明海兔素可能抑制抗凋亡蛋白基因的表達(dá)，從而減輕其對(duì)TRAIL的抗性．
（3）綜上所述，海兔素對(duì)于癌癥的治療有一定的效果，且這種作用與時(shí)間和劑量呈現(xiàn)出相關(guān)性．
故答案為：
（1）血清     胰蛋白酶    不添加海兔素     單獨(dú)研究TRAIL對(duì)細(xì)胞存活率的影響（排除海兔素對(duì)細(xì)胞存活率的影響）      均（有不同程度的）下降     增強(qiáng)
（2）抗凋亡蛋白基因的表達(dá)
（3）時(shí)間劑量

點(diǎn)評(píng) 本題考查了與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)有關(guān)的實(shí)驗(yàn)探究，要求考生能夠掌握動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程，識(shí)記胰蛋白酶在培養(yǎng)過(guò)程中的運(yùn)用，并能夠根據(jù)實(shí)驗(yàn)的柱形圖和凝膠電泳圖得出相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)論．