Question

15．如表是某同學列出的分離并計數土壤中微生物培養基的配方，據此回答下列問題：

KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO4•7H2O	0.2g
葡萄糖	10.0g
尿素	1.0g
瓊脂	15.0g

（1）制備培養基時，將上述物質溶解并用蒸餾水定容至1000mL后，還要進行滅菌和倒平板．
（2）從功能上看，該培養基屬于選擇培養基，細菌能利用培養基中的氮源是由于能合成脲酶（催化尿素分解的酶）．
（3）用稀釋涂布平板法統計樣本菌落數時，（需要/不需要）需要設置對照組（即不接種進行培養），原因是判斷培養基是否被雜菌污染
（4）某同學在3個培養基上分別涂布稀釋倍數為10⁶的土壤樣液0.1mL，培養一段時間后，其菌落數分別為180、220、320個，則每毫升原土壤樣液中上述微生物的數量為2.4×10⁹，此方法測定的活菌數比實際活菌數少的原因為當兩個或多個細菌連在一起時，平板上只能觀察到一個菌落．

Answer 1

分析 1、培養微生物時，培養基中需要加入碳源、氮源、無機鹽、水，還需要滿足微生物生長對PH，特殊營養物質以及氧氣的要求．如培養乳酸菌需要加入維生素，培養霉菌需要把PH值調到酸性等．
2、能夠分解利用尿素的細菌，其細胞內含有脲酶，可以把尿素分解成氨，提供N源，進一步利用，只含有尿素作為N源的培養基對微生物具有選擇作用．

解答 解：（1）制備培養基時，將上述物質溶解并用蒸餾水定容至1000mL后，還要進行滅菌和倒平板．
（2）分析表格可知，培養基中以尿素作為唯一氮源，能生長的菌落說明能利用尿素中的氮源，所以該培養基從用途上屬于選擇培養基．細菌能利用培養基中的氮源是由于能合成脲酶（催化尿素分解的酶）．
（3）用稀釋涂布平板法統計樣本菌落數時，為了判斷培養基是否被雜菌污染，因此實驗需要設置對照組（即不接種進行培養）．
（4）某同學在3個培養基上分別涂布稀釋倍數為10⁶的土壤樣液0.1mL，培養一段時間后，其菌落數分別為180、220、320個，則每毫升原土壤樣液中上述微生物的數量=（180+220+320）÷3×10⁶÷0.1=2.4×10⁹，此方法測定的活菌數比實際活菌數少的原因為當兩個或多個細菌連在一起時，平板上只能觀察到一個菌落．
故答案為：
（1）滅菌倒平板
（2）選擇脲酶（催化尿素分解的酶）
（3）需要判斷培養基是否被雜菌污染
（4）2.4×10⁹當兩個或多個細菌連在一起時，平板上只能觀察到一個菌落

點評 本題考查微生物的培養、分解尿素的細菌的分離和計數等相關知識，意在考查考生識記所列知識點，并能運用所學知識做出合理的判斷或得出正確的結論的能力．