Question

16．實驗表明，乙植物的耐旱能力很差．某研究機構計劃采用基因工程的方法，通過如圖所示的程序培育耐旱的乙植物新品種：

請據圖回答下列相關問題：
（1）通過PCR技術擴增耐旱基因時，需要Taq酶，該酶最大的特點是耐高溫．
（2）圖中使用的載體最可能是Ti質粒．在構建基因表達載體時，耐旱基因應該插入到該載體的T-DNA中．
（3）圖中的載體上必須含有標記基因，以便檢測農桿菌細胞和乙植物的愈傷組織細胞中是否導入了目的基因．
（4）將目的基因導入植物細胞采用最多的方法是農桿菌轉化法．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為培育耐旱的乙植物新品種的過程，其中A表示基因表達載體的構建過程；B表示將重組質粒導入農桿菌細胞；C表示用選擇培養基篩選出含有重組質粒的農桿菌；D表示用含有重組質粒的農桿菌干擾乙植物體細胞，進而將目的基因導入受體細胞；最后采用植物組織培養技術將轉基因細胞培育成轉基因植株．

解答 解：（1）PCR技術需要在較高溫度條件下進行，因此需要耐高溫DNA聚合酶，即Taq酶．
（2）圖中將目的基因導入受體細胞的方法是農桿菌轉化法，因此使用的載體最可能是Ti質粒；農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上，因此在構建基因表達載體時，耐旱基因應該插入到該載體的T-DNA中．
（3）載體上必須含有標記基因，以便檢測農桿菌細胞和乙植物的愈傷組織細胞中是否導入了目的基因．
（4）將目的基因導入植物細胞采用最多的方法是農桿菌轉化法．
故答案為：
（1）耐高溫
（2）Ti質粒　　T-DNA
（3）農桿菌　　乙植物的愈傷組織　　目的基因
（4）農桿菌轉化法

點評 本題結合培育耐旱的乙植物新品種的過程圖解，考查基因工程和蛋白質工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，掌握各步驟中應注意的細節，能結合圖中信息答題．