Question

6．家蠶細胞具有高效表達外源基因能力．將人干擾素基因導入家蠶細胞并大規模培養，可以提取干擾素用于制藥．
（1）進行轉基因操作前，需用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細胞．
（2）為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的啟動子和終止子之間；若要檢測干擾素基因在家蠶細胞中是否表達，采用的技術有分子雜交技術和抗原-抗體雜交技術．
（3）培養家蠶細胞時，細胞會產生貼壁生長和增大細胞貼壁生長的附著面積現象．通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中，這樣可以接觸抑制，增加培養的細胞數量，也有利于空氣交換．

Answer 1

分析 基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與表達．從分子水平上檢測目的基因的方法：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．

解答 解：（1）為了使組織分散開為單個細胞通常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶．
（2）基因表達載體包括啟動子、終止子、目的基因和標記基因．啟動子位于目的基因的首端，終止子位于目的基因的尾端．若要檢測干擾素基因在家蠶細胞中是否表達，采用的技術有DNA-RNA分子雜交技術檢測是否轉錄形成RNA和用抗原-抗體雜交技術檢測是否有表達產物產生．
（3）利用生物反應器培養家蠶細胞時，貼壁生長的細胞會產生接觸抑制．通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中，這樣可以增大細胞貼壁生長的附著面積增加培養的細胞數量，也有利于空氣交換．
故答案為：
（1）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）
（2）啟動子   終止子     分子雜交技術      抗原-抗體雜交技術
（3）接觸抑制    增大細胞貼壁生長的附著面積

點評 本題考查基因工程、細胞工程等相關知識，著重識記動物細胞培養和PCR技術的有關內容，意在考查考生的識記能力和應用能力，屬于容易題．